Ппд Лекарство Для Животных

Содержание

Межгосударственный стандарт ГОСТ 32306-2020 «Туберкулины очищенные (ППД) для животных. Технические условия» (введен в действие приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 17 октября 2020 г. N 1169-ст)

Межгосударственный стандарт ГОСТ 32306-2020
«Туберкулины очищенные (ППД) для животных. Технические условия»
(введен в действие приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 17 октября 2020 г. N 1169-ст)

Purified tuberculins (PPD) for animals. Specifications

Дата введения — 2020-01-01

1 Разработан Федеральным государственным бюджетным учреждением «Всероссийский государственный Центр качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов» (ФГБУ «ВГНКИ») и Федеральным государственным унитарным предприятием «Курская биофабрика — фирма «БИОК» (ФГУП «Курская биофабрика»)

2 Внесен Федеральным агентством по техническому регулированию и метрологии Российской Федерации (ТК 454)

3 Принят Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол от 27 сентября 2020 г. N 59-П)

За принятие стандарта проголосовали:

Краткое наименование страны
по MK (ИСО 3166) 004-97

Сокращенное наименование национального органа по стандартизации

Минэкономики Республики Армения

Госстандарт Республики Беларусь

Госстандарт Республики Казахстан

4 Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 17 октября 2020 г. N 1169-ст межгосударственный стандарт ГОСТ 32306-2020 введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 января 2020 года.

Откройте актуальную версию документа прямо сейчас или получите полный доступ к системе ГАРАНТ на 3 дня бесплатно!

Если вы являетесь пользователем интернет-версии системы ГАРАНТ, вы можете открыть этот документ прямо сейчас или запросить по Горячей линии в системе.

Госстандарт Республики Беларусь

Адвантикс — препарат для животных

Что содержится в «Адвантиксе»

· Препарат содержит перметрин, который обладает парализующим эффектом, воздействуя на мембраны нервных клеток насекомых.

· Имидаклоприд – сильнодействующий инсектицид, который используется в борьбе с паразитами более десяти лет, и за это время насекомые не смогли выработать невосприимчивость к нему. Является одним из основных составляющих «Адвантикса».

Действие «Адвантикса»

Попадая на кожу собаки, препарат быстро всасывается, не вызывает местного раздражения и хорошо переносится взрослым животным. Длительность действия не превышает одного месяца, поэтому в сезон активности клещей обрабатывать пса нужно регулярно. В зимний период достаточно однократно обработать собаку.

· «Адвантикс» отлично работает, когда надо быстро избавить животное от блох, он уничтожает не только взрослых насекомых, но и их личинки.

· Этот препарат является наиболее эффективным в борьбе с иксодовыми клещами, он не только убивает насекомых, но и отпугивает их. Это очень важное свойство, которое помогает защитить собаку от смертельно опасного пироплазмоза.

· Антимоскитное действие «Адвантикса» выражено не сильно, хотя и заявлено в аннотации. Комары и мухи все же кусают собак, обработанных этим препаратом.

Способ применения

«Адвантикс» не обладает тератогенным действием, но производители не рекомендуют использовать его для обработки щенных сук. Химические препараты, содержащиеся в каплях, могут ослабить организм больных и выздоравливающих животных, а также вызвать сильную аллергическую реакцию у щенков, не достигших полутора месяцев.

Нанесение капель на холку производится через несколько дней после купания питомца, после этого мыть собаку можно только через три дня. Лучше всего препарат распределяется на коже при капельном нанесении, шерсть при этом раздвигают, чтобы капли попали на кожу.

· Антимоскитное действие «Адвантикса» выражено не сильно, хотя и заявлено в аннотации. Комары и мухи все же кусают собак, обработанных этим препаратом.

ГОСТ 32306-2020 Туберкулины очищенные (ППД) для животных. Технические условия

Текст ГОСТ 32306-2020 Туберкулины очищенные (ППД) для животных. Технические условия

ТУБЕРКУЛИНЫ ОЧИЩЕННЫЕ (ППД) ДЛЯ ЖИВОТНЫХ

Purified tuberculins (PPD) for animals. Specifications

Дата введения 2020-01-01

Цели, основные принципы и основной порядок проведения работ по межгосударственной стандартизации установлены ГОСТ 1.0-92 «Межгосударственная система стандартизации. Основные положения» и ГОСТ 1.2-2020 «Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные, правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, применения, обновления и отмены»

Сведения о стандарте

1 РАЗРАБОТАН Федеральным государственным бюджетным учреждением «Всероссийский государственный Центр качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов» (ФГБУ «ВГНКИ») и Федеральным государственным унитарным предприятием «Курская биофабрика — фирма «БИОК» (ФГУП «Курская биофабрика»)

2 ВНЕСЕН Федеральным агентством по техническому регулированию и метрологии Российской Федерации (ТК 454)

3 ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол от 27 сентября 2020 г. N 59-П)

За принятие стандарта проголосовали:

Краткое наименование страны
по МК (ИСО 3166) 004-97

Код страны
по МК (ИСО 3166) 004-97

Сокращенное наименование национального органа по стандартизации

Минэкономики Республики Армения

Госстандарт Республики Беларусь

Госстандарт Республики Казахстан

5 ВЗАМЕН ГОСТ 16739-88 и ГОСТ 23881-79

Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодном информационном указателе «Национальные стандарты», а текст изменений и поправок — в ежемесячном информационном указателе «Национальные стандарты». В случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ежемесячном информационном указателе «Национальные стандарты». Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования — на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет.

1 Область применения

Настоящий стандарт распространяется на туберкулины очищенные (ППД) для животных, применяемые для диагностики туберкулеза у животных в реакции гиперчувствительности замедленного типа (далее — туберкулины).

2 Нормативные ссылки

В настоящем стандарте использованы ссылки на следующие стандарты:

ГОСТ 12.0.004-90 Система стандартов безопасности труда. Организация обучения безопасности труда. Общие положения

ГОСТ 12.1.005-88 Система стандартов безопасности труда. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны

ГОСТ 12.1.008-76 Система стандартов безопасности труда. Биологическая безопасность. Общие требования

ГОСТ 12.4.011-89 Система стандартов безопасности труда. Средства защиты работающих. Общие требования и классификация

ГОСТ 177-88 Водорода перекись. Технические условия

ГОСТ 244-76 Реактивы. Натрия тиосульфат кристаллический. Технические условия

ГОСТ 1277-75 Реактивы. Серебро азотнокислое. Технические условия

ГОСТ 1770-74 (ИСО 1042-83, ИСО 4788-80) Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Технические условия

ГОСТ 4160-74 Реактивы. Калий бромистый. Технические условия

ГОСТ 4204-77 Реактивы. Кислота серная. Технические условия

ГОСТ 4232-74 Реактивы. Калий йодистый. Технические условия

ГОСТ 4233-77 Реактивы. Натрий хлористый. Технические условия

ГОСТ 4328-77 Реактивы. Натрия гидроокись. Технические условия

ГОСТ 4457-74 Реактивы. Калий бромноватокислый. Технические условия

ГОСТ 4459-75 Реактивы. Калий хромовокислый. Технические условия

ГОСТ 4919.1-77 Реактивы и особо чистые вещества. Методы приготовления растворов индикаторов

ГОСТ 6709-72 Вода дистиллированная. Технические условия

ГОСТ ISO 7218-2020 Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. Общие требования и рекомендации по микробиологическим исследованиям

ГОСТ 7933-89 Картон для потребительской тары. Общие технические условия

ГОСТ 9142-90 Ящики из гофрированного картона. Общие технические условия

ГОСТ 12026-76 Бумага фильтровальная лабораторная. Технические условия

ГОСТ 12301-2020 Коробки из картона, бумаги и комбинированных материалов. Общие технические условия

ГОСТ 12303-80 Пачки из картона, бумаги и комбинированных материалов. Общие технические условия

ГОСТ 14192-96 Маркировка грузов

ГОСТ 14261-77 Кислота соляная особой чистоты. Технические условия

ГОСТ ИСО/МЭК 17025-2020 Общие требования к компетентности испытательных и калибровочных лабораторий

ГОСТ 17527-2020 Упаковка. Термины и определения

ГОСТ 18300-87 Спирт этиловый ректификованный технический. Технические условия

ГОСТ 18481-81 Ареометры и цилиндры стеклянные. Общие технические условия

ГОСТ 22967-90 Шприцы медицинские инъекционные многократного применения. Общие технические требования и методы испытаний

ГОСТ 24861-91 (ИСО 7886-1-2020) Шприцы инъекционные однократного применения

ГОСТ 25046-81 (ИСО 7864-2020) Иглы инъекционные однократного применения. Основные размеры. Технические требования. Методы испытаний

ГОСТ 25336-82 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры

ГОСТ 28083-2020 Средства лекарственные биологические для ветеринарного применения. Метод контроля вакуума в ампулах и флаконах

ГОСТ 28085-2020* Средства лекарственные биологические для ветеринарного применения. Метод бактериологического контроля стерильности

________________
* На территории Российской Федерации действует ГОСТ 28085-2020. — .

ГОСТ 29230-91 (ИСО 835-4-81) Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 4. Пипетки выдувные

ГОСТ 29251-91 (ИСО 385-1-84) Посуда лабораторная стеклянная. Бюретки. Часть 1. Общие требования

ГОСТ 31926-2020 Средства лекарственные для ветеринарного применения. Методы определения безвредности

ГОСТ 31929-2020 Средства лекарственные для ветеринарного применения. Правила приемки, методы отбора проб

Примечание — При пользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действие ссылочных стандартов в информационной системе общего пользования — на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет или по ежегодному информационному указателю «Национальные стандарты», который опубликован по состоянию на 1 января текущего года, и по выпускам ежемесячного информационного указателя «Национальные стандарты» за текущий год. Если ссылочный стандарт заменен (изменен), то при пользовании настоящим стандартом следует руководствоваться заменяющим (измененным) стандартом. Если ссылочный стандарт отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, применяется в части, не затрагивающей эту ссылку.

3 Термины, определения и сокращения

3.1 В настоящем стандарте применены термины по ГОСТ 17527, а также следующие термины с соответствующими определениями:

3.1.1 туберкулин очищенный (ППД) для животных: Лекарственный препарат, представляющий собой очищенную белковую фракцию, выделенную из культурального фильтрата возбудителей туберкулеза бычьего или птичьего видов, выращенных на синтетической питательной среде и инактивированных термически.

3.1.2 Bacille de Calmette et de Guerin, BCG: Вакцинный штамм микобактерий туберкулеза М. bovis со сниженной вирулентностью, полученный в результате многолетнего культивирования на глицериново-картофельной среде с желчью.

3.1.3 международная единица активности, ME: Единица активности Международного стандарта туберкулина, принятого Всемирной организацией здравоохранения (ВОЗ).

3.1.4 стандарт туберкулина очищенного (ППД) для животных (эталонный образец): Серия туберкулина очищенного (ППД) для млекопитающих или туберкулина очищенного (ППД) для птиц в лиофилизированной форме, откалиброванная по активности относительно принятых Всемирной организацией здравоохранения (ВОЗ) действующих международных стандартов туберкулина очищенного PPD bovine или туберкулина очищенного PPD avium соответственно, и оформленная паспортом с указанием содержания в ампуле международных единиц активности.

3.2 В настоящем стандарте применены следующие сокращения:

ГЗТ — гиперчувствительность замедленного типа;

ППД — protein purified derivative (PPD);

ТХУ — трихлоруксусная кислота.

4 Классификация

Туберкулины выпускают в двух видах: туберкулин очищенный (ППД) для млекопитающих и туберкулин очищенный (ППД) для птиц.

Туберкулины выпускают в жидкой и лиофилизированной формах.

5 Условия выполнения испытаний и требования безопасности

5.1 Условия выполнения испытаний

5.1.1 Общие требования проведения микробиологического анализа и работы с микроорганизмами III-IV групп патогенности — по ГОСТ ISO 7218.

5.1.2 Общие требования к помещениям — по ГОСТ ISO 7218.

5.1.3 Требования к персоналу — по ГОСТ ISO 7218, ГОСТ ИСО/МЭК 17025.

К проведению испытаний допускаются квалифицированные сотрудники, имеющие опыт работы с микроорганизмами III-IV групп патогенности, изучившие методики микробиологических работ.

5.2 Требования безопасности

5.2.1 По биологической безопасности туберкулины должны соответствовать требованиям ГОСТ 12.1.008.

5.2.2 Требования к обучению персонала безопасности труда — по ГОСТ 12.0.004.

5.2.3 Средства защиты работающих — по ГОСТ 12.4.011, воздух рабочей зоны должен соответствовать требованиям ГОСТ 12.1.005.

5.2.4 Утилизация туберкулинов с истекшим сроком годности и серий, не выдержавших контрольных испытаний, а также туберкулина во флаконах, оставшихся после испытаний по показателям качества, и архивных образцов после истечения срока хранения не требует специальных мер безопасности.

6 Технические требования

6.1 Туберкулины должны соответствовать требованиям настоящего стандарта и изготавливаться в соответствии с технологическим регламентом производства, утвержденным организацией-производителем в порядке, действующем на территории государства, принявшего стандарт.

6.2 Туберкулины по органолептическим, физико-химическим, химическим и биологическим свойствам должны соответствовать требованиям и нормам, указанным в таблице 1.

Характеристика и норма

Прозрачная жидкость светло-коричневого цвета без осадка

Сухая кристаллическая масса светло-коричневого цвета

Наличие вакуума в ампулах

Должен быть вакуум

Растворимость и однородность раствора

Должен полностью раствориться в течение 3 мин с образованием прозрачного раствора светло-коричневого цвета без осадка

Концентрация водородных ионов, ед. рН

6,5-7,5 после добавления растворителя микобактериальных аллергенов

Количество белка, мг/см , не более

1,0 после добавления растворителя микобактериальных аллергенов

Массовая доля глицерина, %, не более

Массовая доля хлорида натрия, %

Массовая доля фенола, %, не более

Должен быть стерильным

Не должно быть воспалительной реакции в месте внутрикожного введения туберкулина, допускается покраснение диаметром не более 5 мм

Должен быть безвредным

Живые микобактерии должны отсутствовать

Многократное внутрикожное введение не должно вызывать у животных повышенной чувствительности замедленного типа (сенсибилизации)

Активность туберкулина (ППД) для млекопитающих, МЕ/см

Активен не менее 66% и не более 150% от значения предполагаемой активности

10000 после добавления растворителя микобактериальных аллергенов

Активность туберкулина (ППД) для птиц, МЕ/см

Активен не менее 75% и не более 133% от значения предполагаемой активности

25000, после добавления растворителя микобактериальных аллергенов

Специфичность туберкулина (ППД) для млекопитающих, %, не более

10 [от активности туберкулина (ППД) для птиц на морских свинках, сенсибилизированных М. avium]

Специфичность туберкулина (ППД) для птиц, %, не более

10 [от активности туберкулина (ППД) для млекопитающих на морских свинках, сенсибилизированных М. bovis]

* Для диагностики туберкулеза у животных с пониженной аллергической чувствительностью и для проведения исследований у животных с высокой степенью риска заболевания рекомендована доза введения одному животному 5000 ME в 0,2 см туберкулина (ППД) для млекопитающих, соответственно его активность должна составлять 25000 МЕ/см .

6.3 Упаковка и маркировка

6.3.1 Туберкулин в жидкой форме расфасовывают по 1-20 см в стерильные флаконы или ампулы соответствующей вместимости. Флаконы укупоривают резиновыми пробками и обкатывают алюминиевыми колпачками. Ампулы запаивают.

6.3.2 Для лиофилизации туберкулин расфасовывают в стерильные флаконы или ампулы вместимостью 1-20 см с таким расчетом, чтобы при растворении туберкулина (ППД) для млекопитающих в прилагаемом растворителе активность составляла 10000 МЕ/см , при растворении туберкулина (ППД) для птиц — 25000 МЕ/см . После лиофилизации флаконы укупоривают резиновыми пробками и обкатывают алюминиевыми колпачками. Ампулы запаивают под вакуумом.

6.3.3 Флаконы (ампулы) с туберкулином маркируют несмываемой краской по стеклу или наклеивают этикетки.

6.3.3.1 На флаконах (ампулах) с туберкулином хорошо читаемым шрифтом должно быть указано:

— наименование и адрес организации-производителя;

— товарный знак организации-производителя;

— наименование лекарственного препарата;

— дата выпуска (месяц, год);

— надпись: «годен до»;

— количество туберкулина во флаконе: для жидкой лекарственной формы — в см , для лиофилизированной лекарственной формы — в ME;

— активность, МЕ/см (для туберкулина в лиофилизированной форме — после растворения в рекомендуемом объеме растворителя);

— надпись: «Для ветеринарного применения».

6.3.4 Флаконы (ампулы) с туберкулином упаковывают в картонные коробки по ГОСТ 12301 или пачки по ГОСТ 12303 с разделительными перегородками из картона по ГОСТ 7933, обеспечивающими сохранность флаконов (ампул).

Допускаются другие виды упаковки, обеспечивающие сохранность флаконов (ампул).

6.3.5 На каждую коробку (пачку) с туберкулином наклеивают этикетку, на которой хорошо читаемым шрифтом указывают:

— наименование и адрес организации-производителя;

— товарный знак организации-производителя;

— наименование лекарственного препарата;

— номер регистрационного удостоверения;

— дату выпуска (месяц, год);

— надпись: «годен до»;

— количество доз во флаконе;

— количество флаконов (ампул) в коробке;

— надпись: «Для ветеринарного применения»;

В каждую коробку вкладывают от одной до пяти инструкций по применению.

6.3.6 К каждой коробке (пачке) с туберкулином в лиофилизированной форме прилагают коробку (пачку) с таким же количеством флаконов (ампул) с растворителем или в коробку (пачку) с туберкулином в лиофилизированной форме упаковывают равное количество флаконов (ампул) с растворителем. Объем растворителя в каждом флаконе (ампуле) должен быть таким, чтобы активность после растворения лиофилизированного туберкулина (ППД) для млекопитающих составляла 10000 МЕ/см , лиофилизированного туберкулина (ППД) для птиц — 25000 МЕ/см .

6.3.7 Коробки (пачки) с туберкулином упаковывают в ящики из гофрированного картона по ГОСТ 9142 (с прокладками из картона) массой брутто не более 15 кг.

6.3.7.1 Внутрь каждого ящика вкладывают упаковочный лист с указанием:

— наименования лекарственного препарата;

— числа упаковочных единиц в ящике;

— фамилии или номера упаковщика.

Примечание — Допускается не вкладывать упаковочный лист в ящик.

6.3.8 На этикетке транспортной тары должно быть указано:

— наименование и адрес (с указанием страны) организации-производителя;

— товарный знак организации-производителя;

— наименование лекарственного препарата;

— дата выпуска (месяц, год);

— количество коробок (пачек);

— надпись: «годен до»;

— условия хранения и перевозки;

— надпись: «Для ветеринарного применения».

6.3.9 На каждый ящик наносят транспортную маркировку по ГОСТ 14192 с нанесением манипуляционных знаков: «Хрупкое. Осторожно», «Беречь от солнечных лучей», «Ограничение температуры», «Верх».

6.3.10 Совмещение транспортной маркировки и маркировки, характеризующей данные об упакованной продукции, на одной стороне транспортной тары не допускается.

7 Правила приемки

7.1 Каждая серия туберкулина должна быть принята (проверена) в организации-производителе отделом, отвечающим за контроль качества готовой продукции в соответствии с ГОСТ 31929.

7.2 Серией туберкулина считают определенное количество лекарственного препарата, произведенное за один технологический цикл и оформленное одним документом о качестве.

7.3 В документе о качестве указывают:

— наименование и адрес организации-производителя;

— наименование лекарственного препарата;

— дату изготовления (месяц, год);

— результаты анализа по показателям качества;

— надпись: «годен до»;

— обозначение настоящего стандарта;

— номер документа о качестве и дату его выдачи;

— подпись уполномоченного лица организации-производителя, выдавшего документ о качестве.

7.4 После проверки внешнего вида, качества упаковки и маркировки, методом случайного отбора в соответствии с ГОСТ 31929 из серии туберкулина отбирают пробы, количество которых должно обеспечить проведение испытаний в трех повторностях. Одновременно в таком же количестве отбирают пробы для хранения в архиве отдела, отвечающего за контроль качества готовой продукции организации-производителя. Пробы препарата отправляют в архив после проведения испытаний по показателям, установленным настоящим стандартом.

Срок хранения в архиве составляет для туберкулина в жидкой форме — два года, для туберкулина в лиофилизированной форме — три года.

Архивные пробы снабжают этикеткой. На этикетке указывают:

— наименование лекарственного препарата;

— дату выпуска (месяц, год);

— дату закладки в архив;

— срок хранения в архиве;

— количество проб отобранного лекарственного препарата;

— должность и подпись лица, отобравшего образцы.

На пробы ставят штамп «Архив».

7.5 При получении неудовлетворительных результатов испытания хотя бы по одному из показателей, проводят повторные испытания по этому показателю на удвоенном количестве проб туберкулина, отобранных из той же серии. Результаты повторной проверки распространяются на всю серию. При получении неудовлетворительных результатов повторной проверки, серию туберкулина считают несоответствующей требованиям настоящего стандарта и выбраковывают.

8 Методы испытания

8.1 Средства измерений, аппаратура, материалы, реактивы и животные

Для проведения испытаний применяют:

— фотоэлектроколориметр с цифровой индикацией результатов измерений и рабочей длины волны, спектральным диапазоном длин волн 315-990 нм, диапазонами измерений: коэффициента пропускания от 0,1% до 100%, оптической плотности А от 0 до 3 ед., пределом допускаемой абсолютной погрешности установки длины волны — 3 нм, погрешностью измерений ±0,5%, температурным режимом работы от 10 °С до 40 °С;

— рН-метр, обеспечивающий измерение с точностью до 0,05 ед. рН, с разрешением 0,01 ед. рН, оснащенный ручным или автоматическим определителем температуры;

— холодильник бытовой, обеспечивающий поддержание температуры от 4 °С до 6 °С;

— калий хромовокислый по ГОСТ 4459, 10%-ный раствор;

— серебро азотнокислое по ГОСТ 1277, раствор молярной концентрации 0,1 моль/дм ;

— воду дистиллированную по ГОСТ 6709;

— кислоту серную по ГОСТ 4204, раствор молярной концентрации 0,05 моль/дм ;

— натрия гидроокись по ГОСТ 4328, 30%-33%-ный раствор и раствор на прокипяченной дистиллированной воде молярной концентрации 0,1 моль/дм ;

— водорода перекись по ГОСТ 177;

— метиловый оранжевый по ГОСТ 4919.1;

— ТХУ, раствор с массовой долей 20%;

— туберкулин с известной концентрацией белка, определенной методом Кьельдаля;

— калий бромноватокислый по ГОСТ 4457;

— калий бромистый по ГОСТ 4160, раствор молярной концентрации 0,1 моль/дм ;

— стандарт-титр калий бромид-бромат, раствор молярной концентрации 0,1 моль/дм ;

— калий йодистый по ГОСТ 4232, 20%-ный раствор;

— кислоту соляную по ГОСТ 14261, 10%-ный раствор;

— натрия тиосульфат по ГОСТ 244, раствор молярной концентрации 0,05 моль/дм ;

— спирт этиловый ректификованный по ГОСТ 18300, 70%-ный раствор;

— метиловый красный по ГОСТ 4919.1;

— метиленовый синий по ГОСТ 4949.1*;

________________
* Вероятно, ошибка оригинала. Следует читать: ГОСТ 4919.1. — .

— индикатор крахмал, 1%-ный раствор;

— краску на метки;

— фенол 0,3%-ный раствор в дистиллированной воде;

— раствор натрия хлорида стерильный физиологический, рН 6,5-7,5;

— патогенный штамм микобактерий птичьего вида, суспензированный в физиологическом растворе;

— стандарт (эталонный образец) туберкулина сухого очищенного (ППД) для млекопитающих;

— стандарт (эталонный образец) туберкулина сухого очищенного (ППД) для птиц;

или убитые нагреванием высушенные микобактерии бычьего вида, суспензированные в стерильном жидком парафине,

или живые микобактерии бычьего вида патогенного штамма, суспензированные в физиологическом растворе;

— морских свинок альбиносов или с белыми боками клинически здоровых массой не менее 250 г и не менее 400 г;

— колбу Кьельдаля вместимостью 50 и 100 см по ГОСТ 25336;

— аппарат перегонный Кьельдаля или автоматический аппарат для определения азота по Кьельдалю;

— пипетки вместимостью 1, 2, 5 и 10 см по ГОСТ 29230;

— бюретки по ГОСТ 29251;

— колбы конические вместимостью 250 и 1000 см по ГОСТ 25336;

— капельницу по ГОСТ 25336;

— пробирки стеклянные по ГОСТ 25336;

— цилиндры вместимостью 100, 250 и 500 см по ГОСТ 1770;

— ареометры по ГОСТ 18481;

— колбы мерные с притертой пробкой вместимостью 100 и 1000 см по ГОСТ 1770;

— шприцы вместимостью 1 см по ГОСТ 22967 или ГОСТ 24861;

— иглы инъекционные по ГОСТ 25046;

— бумагу индикаторную по ГОСТ 4919.1;

— фильтры бумажные обеззоленные;

— бумагу фильтровальную по ГОСТ 12026.

Допускается применение других средств измерений, аппаратуры, не уступающих вышеуказанным по метрологическим и техническим характеристикам и обеспечивающим необходимую точность измерения, а также реактивов и материалов по качеству не хуже вышеуказанных.

8.2 Определение внешнего вида

Для определения внешнего вида каждый флакон (ампулу) с туберкулином просматривают визуально в прямом свете, а флакон (ампулу) с туберкулином в жидкой форме и в проходящем свете.

8.3 Определение наличия вакуума в ампулах

Наличие вакуума в ампулах определяют согласно ГОСТ 28083.

8.4 Определение растворимости и однородности раствора

Три флакона (ампулы) с туберкулином в лиофилизированной форме растворяют растворителем микобактериальных аллергенов до активности 10000 МЕ/см [туберкулин (ППД) для млекопитающих] и 25000 МЕ/см [туберкулин (ППД) для птиц].

Содержимое флаконов (ампул) встряхивают и просматривают в проходящем свете.

8.5 Определение концентрации водородных ионов

Определение концентрации водородных ионов (рН) туберкулина проводят потенциометрическим методом с помощью рН-метра. рН-метр используют в соответствии с инструкцией производителя.

Туберкулин в лиофилизированной форме предварительно растворяют в соответствии с 8.4.

8.6 Определение количества белка

Количество белка в туберкулине определяют методом Кьельдаля или фотоэлектроколориметрическим методом. Испытания проводят не менее чем в трех повторностях.

Туберкулин в лиофилизированной форме предварительно растворяют по 8.4.

8.6.1 Определение белка по белковому азоту методом Кьельдаля

8.6.1.1 Проведение испытания

В пробирку пипеткой вносят от 1 до 5 см пробы туберкулина, добавляют равный объем 20%-ного раствора ТХУ и помещают в холодильник не менее чем на 4 ч при температуре от 4 °С до 6 °С. Коагулированный белок фильтруют через обеззоленный фильтр, смывая остатки белка из пробирки 5%-ным раствором ТХУ. Белок на фильтре трижды промывают 5%-ным раствором ТХУ для удаления остаточного азота. Фильтр с коагулированным белком слегка просушивают на воздухе, помещают в колбу Кьельдаля, добавляют 2-5 см концентрированной серной кислоты (плотность 1,84 г/см ) и минерализуют при температуре от 300 °С до 400 °С. Минерализацию проводят в присутствии катализатора — перекиси водорода, которую добавляют по 0,5 см через каждые 1,5-2,0 ч до полного обесцвечивания раствора. По окончании минерализации колбу с пробой охлаждают при комнатной температуре, содержимое колбы переносят в колбу для отгона, остатки раствора смывают порциями дистиллированной воды общим объемом не менее 20 см . Полноту переноса проверяют по индикатору метиловому оранжевому. Последняя порция смывных вод должна остаться желтой.

В коническую колбу наливают 10-20 см раствора серной кислоты молярной концентрации 0,05 моль/см и 10-15 капель индикатора Таширо. Индикатор Таширо готовят смешиванием в равных объемах 0,2%-ного спиртового раствора метилового красного и 0,1%-ного спиртового раствора метиленового синего.

Содержимое колбы нейтрализуют 30%-33%-ным раствором гидроокиси натрия, который добавляют из расчета примерно 6 см на 1 см серной концентрированной кислоты, взятой для минерализации. Отгонную колбу подсоединяют к холодильнику и парообразователю. Затем содержимое колбы отгоняют. Отгон аммиака проводят до тех пор, пока в приемной колбе соберется не менее 20 см раствора. Окончание отгона проверяют по индикаторной бумаге.

Содержимое приемной колбы титруют раствором гидроокиси натрия молярной концентрации 0,1 моль/см до перехода окраски раствора от лиловой к зеленой (индикатор реактив Таширо).

Параллельно определяют содержание азота в обеззоленном фильтре (аналогично определению в испытуемой пробе).

8.6.1.2 Обработка результатов

Количество белка , мг/см , вычисляют по формуле

(1)

(2)

где — объем раствора серной кислоты молярной концентрации 0,05 моль/дм , см ;

— объем раствора гидроокиси натрия молярной концентрации 0,1 моль/дм , израсходованный на титрование обеззоленного фильтра (контроль), см ;

— объем раствора гидроокиси натрия молярной концентрации 0,1 моль/дм , израсходованный на титрование испытуемой пробы, см ;

— поправочный коэффициент к титру раствора серной кислоты молярной концентрации 0,05 моль/дм ;

— поправочный коэффициент к титру раствора гидроокиси натрия молярной концентрации 0,1 моль/дм ;

1,4 — коэффициент пересчета на азот (1 см раствора серной кислоты молярной концентрации 0,05 моль/дм эквивалентен 1,4 мг азота);

6,25 — коэффициент пересчета на белок (молекула белка содержит примерно 16% азота);

— объем пробы, взятой для испытания, см .

8.6.2 Определение содержания белка методом фотоэлектроколориметрии

8.6.2.1 Подготовка к испытанию

Определение концентрации белка проводят по градуировочной кривой. Для построения градуировочной кривой готовят в пробирках разведения туберкулина с известной концентрацией белка от 0,01 до 0,20 мг/см с шагом разведения 0,01 мг/см с использованием дистиллированной воды. К полученным разведениям добавляют равный объем 20%-ного раствора ТХУ и перемешивают. Взвесь коагулированного белка из каждой пробирки переносят в кювету и определяют оптическую плотность на фотоэлектроколориметре при длине волны (540±20) нм (зеленый светофильтр). В качестве контрольного раствора используют дистиллированную воду с добавлением равного объема 20%-ного раствора ТХУ. Измерение оптической плотности проводят через 2-3 мин после добавления ТХУ. По полученным данным строят градуировочную кривую, откладывая по горизонтальной оси концентрацию белка, а по вертикальной — соответствующее значение оптической плотности.

8.6.2.2 Проведение испытания

Готовят разведения испытуемой пробы с примерным содержанием белка 0,02-0,20 мг/см . Добавляют равный объем 20%-ного раствора ТХУ, через 2-3 мин взвесь коагулированного белка переносят в кювету и определяют оптическую плотность. Используя градуировочную кривую, определяют концентрацию белка в разведенной пробе. С учетом разведения испытуемой пробы вычисляют содержание белка.

8.7 Определение массовой доли глицерина

8.7.1 Проведение испытания

Сухой цилиндр вместимостью 250 см наполняют физиологическим раствором и замеряют его плотность ареометром. Отсчет по делениям шкалы ареометра ведут по нижнему мениску жидкости в цилиндре.

Таким же способом определяют плотность пробы туберкулина.

8.7.2 Обработка результатов

Для определения плотности глицерина в пробе туберкулина от показателя плотности пробы туберкулина вычитают показатель плотности физиологического раствора, взятого для контроля. Полученный результат сопоставляют с данными таблицы 2 и определяют массовую долю глицерина.

Таблица 2 — Зависимость плотности раствора туберкулина от массовой доли глицерина

Плотность раствора глицерина, г/см

Массовая доля глицерина, %

8.8 Определение массовой доли хлорида натрия

8.8.1 Проведение испытания

10 см пробы туберкулина разбавляют до 40 см дистиллированной водой, приливают 5-10 капель 10%-ного раствора хромовокислого калия в качестве индикатора и титруют раствором азотнокислого серебра молярной концентрации 0,1 моль/дм до оранжево-красного окрашивания.

8.8.2 Обработка результатов

Содержание хлорида натрия Y, %, вычисляют по формуле

(3)

где — объем раствора азотнокислого серебра молярной концентрации 0,1 моль/дм , пошедший на титрование, см ;

— коэффициент поправки раствора азотнокислого серебра молярной концентрации 0,1 моль/дм ;

— объем пробы, взятой для испытания, см ;

0,005845 — коэффициент пересчета на массу хлорида натрия (1 см раствора азотнокислого серебра молярной концентрации 0,1 моль/дм эквивалентен 0,005845 г хлорида натрия)

8.9 Определение массовой доли фенола

8.9.1 Подготовка к испытанию

Приготовление раствора бромистого калия молярной концентрации 0,1 моль/дм

Для приготовления раствора бромистого калия молярной концентрации 0,1 моль/дм из стандарт-титра содержимое ампулы количественно переносят в мерную колбу вместимостью 1000 см . Перед применением стандарт-титра снимают этикетку с ампулы и обмывают наружную поверхность ампулы дистиллированной водой. В мерную колбу вместимостью 1000 см вставляют коническую воронку диаметром 9-10 см, ампулу вскрывают, переворачивают и ее содержимое переносят в колбу через воронку, затем ампулу тщательно промывают изнутри дистиллированной водой в количестве шестикратного объема ампулы. Промывные воды переносят через воронку в мерную колбу с содержимым ампулы. После растворения содержимого ампулы объем жидкости доводят до метки дистиллированной водой.

Или в колбе вместимостью 1000 см растворяют 2,7837 г чистого бромноватокислого калия, высушенного в сухожаровом шкафу при температуре 110 °С до постоянной массы, и 10 г бромистого калия в 1000 см дистиллированной воды.

8.9.2 Проведение испытания

2 см раствора пробы туберкулина вносят в колбу с притертой пробкой, добавляют 2 см 10%-ного раствора соляной кислоты и 25 см раствора бромистого калия молярной концентрации 0,1 моль/дм . Сразу же начинают выделяться кристаллы трибромфенола. Реакция окисления фенола в трибромфенол продолжается при комнатной температуре в течение 15 мин. По истечении этого времени в колбу добавляют 4 см 20%-ного раствора йодистого калия. Выделившийся йод оттитровывают раствором тиосульфата натрия молярной концентрации 0,05 моль/дм . Индикатором служит 1%-ный раствор крахмала.

8.9.3 Обработка результатов

Массовую долю фенола , %, вычисляют по формуле

(4)

где 25 — объем бромистого калия, см ;

— коэффициент поправки раствора бромистого калия;

— объем тиосульфата натрия, израсходованный на титрование, см ;

— коэффициент поправки раствора тиосульфата натрия;

0,001568 — коэффициент пересчета на фенол (1 см раствора тиосульфата натрия молярной концентрации 0,05 моль/дм эквивалентен 0,001568 г фенола);

2 — объем испытуемой пробы, см .

8.10 Определение стерильности

Стерильность туберкулина определяют методом прямого посева в соответствии с ГОСТ 28085 или методом мембранной фильтрации [1].

8.11 Определение реактогенности

У трех морских свинок массой не менее 400 г, не использованных ранее в опытах, удаляют с боков волосяной покров, дезинфицируют кожу 70%-ным раствором этилового спирта и внутрикожно вводят по 500 ME испытуемой пробы туберкулина в объеме 0,1 см растворителя. Учет результатов проводят через 24 ч.

8.12 Определение безвредности

Общие принципы определения безвредности по ГОСТ 31926.

8.12.1 Проведение испытания

Двум морским свинкам, не подвергавшимся ранее действию агентов, которые могут помешать тестированию, вводят подкожно 0,5 см испытуемой пробы туберкулина. За животными наблюдают в течение 7 сут.

8.12.2 Учет результатов

Туберкулин считают безвредным, если в течение наблюдаемого периода не появляется аномальных эффектов (воспалительные реакции, гибель животных).

8.13 Определение остаточной инфекционности (отсутствие живых микобактерий)

8.13.1 Проведение испытания

Испытанию подвергают каждую пятую серию туберкулина. Для определения остаточной инфекционности используют морских свинок массой не менее 250 г, не реагирующих на введение туберкулина.

Не менее чем двум клинически здоровым морским свинкам внутрибрюшинно вводят 5-10 см испытуемой пробы туберкулина (не менее 5 мг сухого вещества на одну морскую свинку).

Примечание — С целью повышения вероятности выявления возможного присутствия живых микобактерий допускается концентрирование испытуемой пробы туберкулина объемом 50-100 см методом мембранной фильтрации [1] или центрифугированием при 2020 g [2]-[3].

За животными наблюдают не менее 42 сут, отмечая случаи гибели или признаки заболевания.

Животных, павших в период срока наблюдения, вскрывают и обследуют макроскопически, а ткани и органы с видимыми патологоанатомическими изменениями — микроскопически и культуральными методами для выявления возможного присутствия микобактерий.

Оставшихся в живых морских свинок, после эвтаназии вскрывают и обследуют макроскопически. В случае видимых патологоанатомических изменений дополнительно проводят микроскопические и культуральные исследования.

Примечание — Организация-производитель может проводить контроль концентрированного материала туберкулина непосредственно перед его разведением и расфасовкой (объем испытуемой пробы концентрата — 5 см на одну морскую свинку) [1].

8.13.2 Учет результатов

Туберкулин считают свободным от живых микобактерий, если все морские свинки остаются живыми и клинически здоровыми в течение периода наблюдения, а в случае проведения дополнительных микроскопических и культуральных исследований живые микобактерии не выявляются.

8.14 Определение наличия сенсибилизирующих свойств

Исследованию подвергают каждую пятую серию туберкулина.

8.14.1 Проведение испытания

Группе из трех морских свинок массой не менее 400 г, не использованных ранее в опытах, удаляют с боков волосяной покров, дезинфицируют кожу 70%-ным раствором этилового спирта и трехкратно с интервалом 5 сут вводят внутрикожно по 500 ME испытуемой пробы туберкулина в 0,1 см растворителя. Через 15-21 сут после третьей инъекции подопытным животным и группе из трех контрольных морских свинок с той же массой тела, ранее не вакцинированных, вводят внутрикожно по 500 ME испытуемой пробы туберкулина в 0,1 см растворителя.

8.14.2 Учет результатов

Реакцию учитывают через 24-48 ч после последней инъекции туберкулина. Реакции в двух группах морских свинок не должны визуально отличаться.

8.15 Определение активности

Активность испытуемой пробы туберкулина устанавливают в международных единицах (ME) сравнением с активностью стандарта туберкулина очищенного (ППД) (эталонного образца) на морских свинках, сенсибилизированных микобактериями соответствующего вида М. bovis или М. avium. Каждая организация-производитель должна использовать свой стандарт туберкулина очищенного (ППД) (эталонный образец) [3].

8.15.1 Определение активности туберкулина очищенного (ППД) для млекопитающих

8.15.1.1 Подготовка к испытанию

За четыре-шесть недель до проведения испытаний сенсибилизируют морских свинок массой не менее 400 г. Сенсибилизированные свинки могут быть использованы в течение 6 мес с интервалом не менее 30 сут между исследованиями.

Для сенсибилизации десяти морским свинкам внутрикожно вводят по 0,2 мг вакцины BCG в 0,1 см стерильного физиологического раствора или внутримышечно вводят 1-2 мг убитых нагреванием, высушенных микобактерий бычьего вида, суспензированных в стерильном жидком парафине, или внутрибрюшинно (внутримышечно) вводят суспензию, содержащую 0,0001 мг (сырой массы) живых микобактерий бычьего вида патогенного штамма в 0,5 см стерильного физиологического раствора.

Из смеси содержимого пяти флаконов (ампул) с туберкулином испытуемой серии с использованием стерильного физиологического раствора готовят три разведения: 1:1000; 1:200; 1:40, что должно соответствовать 1,0; 5,0 и 25,0 ME в 0,1 см . Туберкулин в лиофилизированной форме предварительно растворяют в растворителе микобактериальных аллергенов до активности 10000 МЕ/см по 8.4.

Для приготовления разведении стандарта туберкулина очищенного (ППД) для млекопитающих (эталонного образца) используют три ампулы. К содержимому ампулы добавляют 1 см 0,3%-ного раствора фенола в дистиллированной воде, получая при этом раствор туберкулина с активностью, указанной в паспорте стандарта (эталонного образца). Содержимое трех ампул стандарта (эталонного образца) смешивают и с использованием стерильного физиологического раствора готовят разведения, соответствующие активности 1,0; 5,0 и 25,0 ME в 0,1 см .

8.15.1.2 Проведение испытания

У морских свинок удаляют волосяной покров на боках, дезинфицируют места инъекций 70%-ным раствором этилового спирта и в условные точки (по методу латинского квадрата) вводят внутрикожно отдельными шприцами по 0,1 см каждого разведения испытуемой пробы туберкулина и стандарта (эталонного образца). Морских свинок метят несмываемой краской.

8.15.1.3 Учет результатов

Реакцию у морских свинок учитывают через 24-28 ч путем измерения продольного и поперечного диаметров ответных реакций, образующихся в месте введения туберкулина, и вычисления среднего диаметра каждой ответной реакции.

Для расчета активности используют результаты только у тех свинок, которые к моменту учета имеют диаметр ответных реакций не менее 8 мм и не более 25 мм и реагируют на все разведения туберкулина испытуемой серии и стандарта туберкулина очищенного (ППД) для млекопитающих (эталонного образца). Количество таких свинок должно быть не менее восьми.

Относительную активность туберкулина испытуемой серии вычисляют, исходя из того, что между выраженностью ответной реакции и логарифмом дозы введения аллергена существует линейная зависимость [2].

Для вычисления логарифма относительной активности туберкулина применяют формулу

(5)

где — средний диаметр ответной реакции у морских свинок на одну дозу каждого введения;

— стандарт туберкулина очищенного (ППД) (эталонный образец);

— сумма слагаемых в числителе;

— усредненный тангенс угла наклона прямых зависимости диаметра ответной реакции от логарифма дозы туберкулина при графическом изображении результатов находят по формуле

(6)

где — доза введения туберкулина.

Рекомендуем прочесть: Сафилакок У Собак

В случае определения активности туберкулина очищенного (ППД) для млекопитающих логарифм относительной активности туберкулина формула (5) принимает вид

(7)

где — испытуемый туберкулин;

— стандарт туберкулина очищенного (ППД) для млекопитающих (эталонный образец);

— сумма слагаемых в числителе (для данного случая =3);

— для данного случая находят по формуле

(8)

где — средний диаметр на дозу 25 ME стандарта (эталонного образца);

— средний диаметр на дозу 1 ME стандарта (эталонного образца);

— средний диаметр на дозу 25 ME испытуемого туберкулина;

— средний диаметр на дозу 1 ME испытуемого туберкулина.

Средний диаметр реакции находят по формуле

(9)

где — число животных в опыте;

— отдельный диаметр ответной реакции.

Относительную активность определяют по формуле

(10)

Величина относительной активности туберкулина должна равняться 1,00. Допускается отклонение величины от 0,66 до 1,50 при доверительных границах эксперимента 50%-200% ( 0,95) [1]. За доверительные границы условно принимают ±2 стандартные ошибки при 0,95. Стандартную ошибку определяют по формуле

(11)

где — среднее квадратичное отклонение опыта, рассчитываемое по формуле

(12)

где — число инъекций,

— среднее квадратичное отклонение для величины каждого среднего диаметра , при этом

. (13)

Для выражения активности туберкулина в ME коэффициент относительной активности умножают на предполагаемое значение активности (10000 МЕ/см ).

Активность туберкулина очищенного (ППД) для млекопитающих должна быть не менее 66% (6600 МЕ/см ) и не более 150% (15000 МЕ/см ) от предполагаемой активности (10000 МЕ/см ). Активность туберкулина в лиофилизированной форме определяют после добавления растворителя микобактериальных аллергенов.

8.15.2 Определение активности туберкулина очищенного (ППД) для птиц

8.15.2.1 Подготовка к испытанию

За четыре-шесть недель до проведения испытаний сенсибилизируют морских свинок. Сенсибилизированные свинки могут быть использованы в течение 6 мес с интервалом не менее 30 сут между исследованиями.

Для сенсибилизации морским свинкам внутримышечно вводят 3-4 мг влажной массы живых микобактерий птичьего вида патогенного штамма, суспензированных в 0,5 см стерильного физиологического раствора.

Из смеси содержимого пяти флаконов (ампул) с туберкулином испытуемой серии с использованием стерильного физиологического раствора готовят три разведения: 1 : 500; 1 : 100; 1 : 20, что должно соответствовать 5,0; 25,0 и 125,0 ME в 0,1 см . Туберкулин в лиофилизированной форме предварительно растворяют в растворителе микобактериальных аллергенов до активности 25000 МЕ/см по 8.4.

Для приготовления разведений стандарта туберкулина очищенного (ППД) для птиц (эталонного образца) используют три ампулы. К содержимому ампулы добавляют 1 см 0,3%-ного раствора фенола в дистиллированной воде, получая при этом раствор туберкулина с активностью, указанной в паспорте стандартного (эталонного) образца. Содержимое трех ампул стандарта (эталонного образца) смешивают и с использованием стерильного физиологического раствора готовят разведения, соответствующие активности 5,0, 25,0 и 125 ME в 0,1 см .

8.15.2.2 Проведение испытания

Испытания проводят по 8.15.1.2.

8.15.2.3 Учет результатов

Учет и обработку результатов проводят по 8.15.1.3.

Величина относительной активности туберкулина должна равняться 1,00. Допускается отклонение величины от 0,75 до 1,33 при доверительных границах эксперимента 50%-200% ( 0,95) [1]. За доверительные границы условлено принимают ±2 стандартные ошибки при 0,95.

Для выражения активности туберкулина в ME коэффициент относительной активности умножают на предполагаемую активность (25000 МЕ/см ).

Активность туберкулина очищенного (ППД) для птиц должна быть не менее 75% (18750 ME/см ) и не более 133% (33250 МЕ/см ) от предполагаемой активности (25000 МЕ/см ). Активность туберкулина в лиофилизированной форме определяют после добавления растворителя микобактериальных аллергенов.

8.16 Определение специфичности

Исследованию подвергают каждую пятую серию туберкулина.

8.16.1 Определение специфичности туберкулина для млекопитающих

Специфичность туберкулина очищенного (ППД) для млекопитающих устанавливают в процентах относительно активности туберкулина очищенного (ППД) для птиц на морских свинках, сенсибилизированных М. avium.

8.16.1.1 Подготовка к испытанию

Сенсибилизацию морских свинок проводят по 8.15.2.1.

Для приготовления разведений туберкулина (ППД) для млекопитающих туберкулин в лиофилизированной форме предварительно растворяют в растворителе микобактериальных аллергенов до активности 10000 МЕ/см по 8.4.

Из смеси содержимого пяти флаконов (ампул) испытуемой пробы туберкулина с использованием стерильного физиологического раствора готовят два разведения с 25-кратным интервалом. Дозы испытуемого туберкулина очищенного (ППД) для млекопитающих 1000 и 40 ME в 0,1 см стерильного физиологического раствора дают хорошо читаемые кожные реакции у морских свинок, сенсибилизированных М. avium.

Инъекционные дозы эталонного образца [стандарта туберкулина очищенного (ППД) для птиц] — в 20 раз ниже доз испытуемого туберкулина [туберкулина очищенного (ППД) для млекопитающих]: соответственно 50 и 2 ME в 0,1 см стерильного физиологического раствора.

8.16.1.2 Проведение испытания

Испытания проводят по 8.15.1.2.

8.16.1.3 Учет результатов проводят по 8.15.1.3.

Специфичность , %, рассчитывают по формуле

(14)

где — относительная активность испытуемого туберкулина,

20 — коэффициент кратности доз введения испытуемого туберкулина и эталонного образца туберкулина, относительно которого проводится определение специфичности.

8.16.2 Определение специфичности туберкулина для птиц

Специфичность туберкулина очищенного (ППД) для птиц устанавливают в процентах относительно активности туберкулина очищенного (ППД) для млекопитающих на морских свинках, сенсибилизированных М. bovis.

8.16.2.1 Подготовка к испытанию

Сенсибилизация морских свинок по 8.15.1.1.

Для приготовления разведений туберкулин в лиофилизированной форме предварительно растворяют в растворителе микобактериальных аллергенов до активности 25000 МЕ/см по 8.4.

Из смеси содержимого пяти флаконов (ампул) испытуемой пробы туберкулина с использованием стерильного физиологического раствора готовят два разведения с 25-кратным интервалом. Дозы испытуемого туберкулина очищенного (ППД) для птиц 500 и 20 ME в 0,1 см стерильного физиологического раствора дают хорошо читаемые кожные реакции у морских свинок, сенсибилизированных М. bovis.

Инъекционные дозы эталонного образца [стандарта туберкулина очищенного (ППД) для млекопитающих] — в 20 раз ниже доз испытуемого туберкулина [туберкулина очищенного (ППД) для птиц]: соответственно — 25 и 1 ME в 0,1 см стерильного физиологического раствора.

8.16.2.2 Проведение испытания по 8.15.1.2.

8.16.2.3 Учет результатов проводят по 8.16.1.3.

9 Транспортирование и хранение

9.1 Транспортируют туберкулины всеми видами транспорта в соответствии с правилами перевозок, действующими на данном виде транспорта. Транспортируют туберкулин при температуре от 2 °С до 25 °С. Допускается транспортировать туберкулин при более высокой температуре, но не выше 30 °С, при этом срок транспортирования должен быть не более 20 сут.

9.2 Туберкулины хранят в упаковке производителя в сухих и темных помещениях: в жидкой форме — при температуре от 2 °С до 8 °С; в лиофилизированной форме — при температуре не выше 25 °С в пределах срока годности.

9.3 Срок годности туберкулина в жидкой форме — два года с даты выпуска, в лиофилизированной форме — три года с даты выпуска. Датой изготовления туберкулинов считают дату расфасовки, а датой выпуска считают дату подписания документа о качестве.

Библиография

[1]* European Pharmacopoeia, 7 Edition, Strasbourg, 2020
________________
* Поз. [1]-[3]. Доступ к международным и зарубежным документам можно получить, перейдя по ссылке на сайт . — .

[2] OIE Manual of Diagnostic Tests and Vaccines for Terrestrial Animals, 7 Edition, 2020

[3] World Health Organization Expert Committee on Biological Standardization. Thirty-sixth Report. — Technical Report Series 745. World Health Organization, Geneva, 1988

________________________________________________________________________________________________
УДК 619: 616.98:579.873.21-07 МКС 11.220
65.020.30

Ключевые слова: туберкулин очищенный (ППД) для млекопитающих, туберкулин очищенный (ПДД) для птиц,
диагностика, туберкулез, стерильность, реактогенность, стабилизирующие свойства, активность, специфичность, безвредность
_________________________________________________________________________________________________

Электронный текст документа
и сверен по:
официальное издание
М.: Стандартинформ, 2020

8.15.2.3 Учет результатов

ГОСТ 32306-2020
Туберкулины очищенные (ППД) для животных. Технические условия

Купить ГОСТ 32306-2020 — бумажный документ с голограммой и синими печатями. подробнее

Распространяем нормативную документацию с 2020 года. Пробиваем чеки, платим налоги, принимаем к оплате все законные формы платежей без дополнительных процентов. Наши клиенты защищены Законом. ООО «ЦНТИ Нормоконтроль».

Наши цены ниже, чем в других местах, потому что мы работаем напрямую с поставщиками документов.

Способы доставки

Срочная курьерская доставка (1-3 дня)
Курьерская доставка (7 дней)
Самовывоз из московского офиса
Почта РФ

Распространяется на туберкулины очищенные (ППД) для животных, применяемые для диагностики туберкулеза у животных в реакции гиперчувствительности замедленного типа.

Дата введения:	01.01.2020
Добавлен в базу:	01.10.2020
Актуализация:	01.01.2020

Организации:

27.09.2020	Утвержден	Межгосударственный Совет по стандартизации, метрологии и сертификации	59-П
17.10.2020	Утвержден	Федеральное агентство по техническому регулированию и метрологии	1169-ст
Издан	Стандартинформ	2020 г.
Разработан	ФГУП Курская биофабрика
Разработан	ФГБУ ВГНКИ

Purified tuberculins (PPD) for animals. Specifications

Нормативные ссылки

ГОСТ 12.0.004-90Система стандартов безопасности труда. Организация обучения безопасности труда. Общие положения. Заменен на ГОСТ 12.0.004-2020.
ГОСТ 12.1.005-88Система стандартов безопасности труда. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны
ГОСТ 12.1.008-76Система стандартов безопасности труда. Биологическая безопасность. Общие требования
ГОСТ 12.4.011-89Система стандартов безопасности труда. Средства защиты работающих. Общие требования и классификация
ГОСТ 14192-96Маркировка грузов
ГОСТ 4233-77Реактивы. Натрий хлористый. Технические условия
ГОСТ 6709-72Вода дистиллированная. Технические условия
ГОСТ 12026-76Бумага фильтровальная лабораторная. Технические условия
ГОСТ 12303-80Пачки из картона, бумаги и комбинированных материалов. Общие технические условия. Заменен на ГОСТ 33781-2020.
ГОСТ 1277-75Реактивы. Серебро азотнокислое. Технические условия
ГОСТ 14177-88Шпиндели со встроенным приводом. Общие технические условия
ГОСТ 14261-77Кислота соляная особой чистоты. Технические условия
ГОСТ 1770-74Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия
ГОСТ 177-88Водорода перекись. Технические условия
ГОСТ 18300-87Спирт этиловый ректификованный технический. Технические условия
ГОСТ 18481-81Ареометры и цилиндры стеклянные. Общие технические условия
ГОСТ 22967-90Шприцы медицинские инъекционные многократного применения. Общие технические требования и методы испытаний
ГОСТ 244-76Натрия тиосульфат кристаллический. Технические условия
ГОСТ 24861-91Шприцы инъекционные однократного применения
ГОСТ 25046-81Иглы инъекционные однократного применения. Основные размеры. Технические требования. Методы испытаний
ГОСТ 25336-82Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры
ГОСТ 29230-91Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 4. Пипетки выдувные
ГОСТ 29251-91Посуда лабораторная стеклянная. Бюретки. Часть 1. Общие требования
ГОСТ 4160-74Реактивы. Калий бромистый. Технические условия
ГОСТ 4204-77Реактивы. Кислота серная. Технические условия
ГОСТ 4232-74Реактивы. Калий йодистый. Технические условия
ГОСТ 4328-77Реактивы. Натрия гидроокись. Технические условия
ГОСТ 4457-74Реактивы. Калий бромноватокислый. Технические условия
ГОСТ 4459-75Реактивы. Калий хромово-кислый. Технические условия
ГОСТ 4919.1-77Реактивы и особо чистые вещества. Методы приготовления растворов индикаторов. Заменен на ГОСТ 4919.1-2020.
ГОСТ 7933-89Картон для потребительской тары. Общие технические условия
ГОСТ 9142-90Ящики из гофрированного картона. Общие технические условия. Заменен на ГОСТ 9142-2020.
ГОСТ 17527-2020Упаковка. Термины и определения
ГОСТ 12301-2020Коробки из картона, бумаги и комбинированных материалов. Общие технические условия. Заменен на ГОСТ 33781-2020.
ГОСТ ИСО/МЭК 17025-2020Общие требования к компетентности испытательных и калибровочных лабораторий
ГОСТ ISO 7218-2020Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. Общие требования и рекомендации по микробиологическим исследованиям. Заменен на ГОСТ ISO 7218-2020.
ГОСТ 28083-2020Средства лекарственные биологические лиофилизированные для ветеринарного применения. Метод контроля вакуума в ампулах и флаконах
ГОСТ 31926-2020Средства лекарственные для ветеринарного применения. Методы определения безвредности
ГОСТ 31929-2020Средства лекарственные для ветеринарного применения. Правила приемки, методы отбора проб
ГОСТ 28085-2020Средства лекарственные биологические для ветеринарного применения. Метод бактериологического контроля стерильности

Чтобы бесплатно скачать этот документ в формате PDF, поддержите наш сайт и нажмите кнопку:

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СОВЕТ ПО СТАНДАРТИЗАЦИИ, МЕТРОЛОГИИ И СЕРТИФИКАЦИИ

INTERSTATE COUNCIL FOR STANDARDIZATION, METROLOGY AND CERTIFICATION

ТУБЕРКУЛИНУ ОЧИЩЕННЫЕ (ППД) ДЛЯ ЖИВОТНЫХ

Технические условия

Предисловие

Сведения о стандарте

1 РАЗРАБОТАН Федеральным государственным бюджетным учреждением «Всероссийский государственный Центр качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов» (ФГБУ «ВГНКИ») и Федеральным государственным унитарным предприятием «Курская биофабрика -фирма «БИОК» (ФГУП «Курская биофабрика»)

2 ВНЕСЕН Федеральным агентством по техническому регулированию и метрологии Российской Федерации (ТК 454)

3 ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол от 27 сентября 2020 г. № 59-П)

За принятие стандарта проголосовали:

Краткое наименование страны по МК (ИС0 3166) 004-97

Код страны по МК (ИС0 3166) 004-97

Сокращенное наименование национального органа по стандартизации

Минэкономики Республики Армения

Госстандарт Республики Беларусь

Госстандарт Республики Казахстан

4 Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 17 октября 2020 г. № 1169-ст межгосударственный стандарт ГОСТ 32306-2020 введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 января 2020 года.

В Российской Федерации настоящий стандарт не может быть полностью или частично воспроизведен, тиражирован и распространен в качестве официального издания без разрешения Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии

8.7 Определение массовой доли глицерина

8.7.1 Проведение испытания

Сухой цилиндр вместимостью 250 см 3 наполняют физиологическим раствором и замеряют его плотность ареометром. Отсчет по делениям шкалы ареометра ведут по нижнему мениску жидкости в цилиндре.

Таким же способом определяют плотность пробы туберкулина.

8.7.2 Обработка результатов

Для определения плотности глицерина в пробе туберкулина от показателя плотности пробы туберкулина вычитают показатель плотности физиологического раствора, взятого для контроля. Полученный результат сопоставляют сданными таблицы 2 и определяют массовую долю глицерина.

Таблица 2 — Зависимость плотности раствора туберкулина от массовой доли глицерина

Плотность раствора глицерина, г/см 3

Массовая доля глицерина, %

8.8 Определение массовой доли хлорида натрия

8.8.1 Проведение испытания

10 см 3 пробы туберкулина разбавляют до 40 см 3 дистиллированной водой, приливают 5-10 капель 10%-ного раствора хромовокислого калия в качестве индикатора и титруют раствором азотнокислого серебра молярной концентрации 0,1 моль/дм 3 до оранжево-красного окрашивания.

8.8.2 Обработка результатов

Содержание хлорида натрия Y, %, вычисляют по формуле

где VI — объем раствора азотнокислого серебра молярной концентрации 0,1 моль/дм 3 , пошедший на титрование, см 3 ;

К — коэффициент поправки раствора азотнокислого серебра молярной концентрации 0,1

V₂ — объем пробы, взятой для испытания, см 3 ;

0,005845 — коэффициент пересчета на массу хлорида натрия (1 см 3 раствора азотнокислого серебра молярной концентрации 0,1 моль/дм 3 эквивалентен 0,005845 гхпорида натрия)

8.9 Определение массовой доли фенола

8.9.1 Подготовка к испытанию

Приготовление раствора бромистого калия молярной концентрации 0,1 моль/дм 3

Для приготовления раствора бромистого калия молярной концентрации 0,1 моль/дм 3 из стандарт-титра содержимое ампулы количественно переносят в мерную колбу вместимостью 1000 см 3 . Перед применением стандарт-титра снимают этикетку с ампулы и обмывают наружную поверхность ампулы дистиллированной водой. В мерную колбу вместимостью 1000 см3 вставляют коническую воронку диаметром 9 — 10 см, ампулу вскрывают, переворачивают и ее содержимое переносят в колбу через воронку, затем ампулу тщательно промывают изнутри дистиллированной водой в количестве шестикратного объема ампулы. Промывные воды переносят через воронку в мерную колбу с содержимым ампулы. После растворения содержимого ампулы объем жидкости доводят до метки дистиллированной водой.

Или в колбе вместимостью 1000 см 3 растворяют 2,7837 г чистого бромноватокислого калия, высушенного в сухожаровом шкафу при температуре 110 °С до постоянной массы, и 10 г бромистого калия в 1000 см 3 дистиллированной воды.

8.9.2 Проведение испытания

2 см3 раствора пробы туберкулина вносят в колбу с притертой пробкой, добавляют 2 см 3 10%-ного раствора соляной кислоты и 25 см 3 раствора бромистого калия молярной концентрации 0,1 моль/дм 3 . Сразу же начинают выделяться кристаллы трибромфенола. Реакция окисления фенола в трибромфенол продолжается при комнатной температуре в течение 15 мин. По истечении этого времени в колбу добавляют 4 см 3 20%-ного раствора йодистого калия. Выделившийся йод оттитровыва-

ют раствором тиосульфата натрия молярной концентрации 0,05 моль/дмЗ. Индикатором служит 1 %-ный раствор крахмала.

8.9.3 Обработка результатов

(25-К-Т -i^)-0,001568 2

Массовую долю фенола Z, %, вычисляют по формуле

где 25 — объем бромистого калия, см 3 ;

К — коэффициент поправки раствора бромистого калия;

Т — объем тиосульфата натрия, израсходованный на титрование, см 3 ;

Ki — коэффициент поправки раствора тиосульфата натрия;

0,001568 — коэффициент пересчета на фенол (1 см 3 раствора тиосульфата натрия молярной концентрации 0,05 моль/дм 3 эквивалентен 0,001568 г фенола);

2 — объем испытуемой пробы, см 3 .

8.10 Определение стерильности

8.11 Определение реакгогенности

У трех морских свинок массой не менее 400 г, не использованных ранее в опытах, удаляют с боков волосяной покров, дезинфицируют кожу 70%-ным раствором этилового спирта и внутри-кожно вводят по 500 ME испытуемой пробы туберкулина в объеме 0,1 см 3 растворителя. Учет результатов проводят через 24 ч.

8.12 Определение безвредности

Общие принципы определения безвредности по ГОСТ 31926.

8.12.1 Проведение испытания

Двум морским свинкам, не подвергавшимся ранее действию агентов, которые могут помешать тестированию, вводят подкожно 0,5 см3 испытуемой пробы туберкулина. За животными наблюдают в течение 7 сут.

8.12.2 Учет результатов

8.13 Определение остаточной инфекционности (отсутствие живых микобактерий)

8.13.1 Проведение испытания

Не менее чем двум клинически здоровым морским свинкам внутрибрюшинно вводят 5-10 см 3 испытуемой пробы туберкулина (не менее 5 мг сухого вещества на одну морскую свинку).

Примечание — С целью повышения вероятности выявления возможного присутствия живых микобактерий допускается концентрирование испытуемой пробы туберкулина объемом 50 — 100 см 3 методом мембранной фильтрации [1] или центрифугированием при 2020 g [2] — [3].

За животными наблюдают не менее 42 сут, отмечая случаи гибели или признаки заболевания.

8.13.2 Учет результатов

Туберкулин считают свободным от живых микобактерий, если все морские свинки остаются живыми и клинически здоровыми в течение периода наблюдения, а в случае проведения дополнительных микроскопичес-ких и культуральных исследований живые микобактерии не выявляются.

8.14 Определение наличия сенсибилизирующих свойств

Исследованию подвергают каждую пятую серию туберкулина.

8.14.1 Проведение испытания

Группе из трех морских свинок массой не менее 400 г, не использованных ранее в опытах, удаляют с боков волосяной покров, дезинфицируют кожу 70%-ным раствором этилового спирта и трехкратно с интервалом 5 сут вводят внутрикожно по 500 ME испытуемой пробы туберкулина в 0,1 см 3 растворителя. Через 15-21 сут после третьей инъекции подопытным животным и группе из трех контрольных морских свинок с той же массой тела, ранее не вакцинированных, вводят внутрикожно по 500 ME испытуемой пробы туберкулина в 0,1 см 3 растворителя.

8.14.2 Учет результатов

Реакцию учитывают через 24 — 48 ч после последней инъекции туберкулина. Реакции в двух группах морских свинок не должны визуально отличаться.

8.15 Определение активности

Активность испытуемой пробы туберкулина устанавливают в международных единицах (ME) сравнением с активностью стандарта туберкулина очищенного (ППД) (эталонного образца) на морских свинках, сенсибилизированных микобактериями соответствующего вида М. bovis или М. avium. Каждая организация-производитель должна использовать свой стандарт туберкулина очищенного (ППД) (эталонный образец) [3].

8.15.1 Определение активности туберкулина очищенного (ППД) для млекопитающих

8.15.1.1 Подготовка к испытанию

За четыре — шесть недель до проведения испытаний сенсибилизируют морских свинок массой не менее 400 г. Сенсибилизированные свинки могут быть использованы в течение 6 мес с интервалом не менее 30 сут между исследованиями.

Для сенсибилизации десяти морским свинкам внутрикожно вводят по 0,2 мг вакцины BCG в 0,1 см 3 стерильного физиологического раствора или внутримышечно вводят 1 — 2 мг убитых нагреванием, высушенных микобактерий бычьего вида, суспензированных в стерильном жидком парафине, или внутрибрюшинно (внутримышечно) вводят суспензию, содержащую 0,0001 мг (сырой массы) живых микобактерий бычьего вида патогенного штамма в 0,5 см 3 стерильного физиологического раствора.

Из смеси содержимого пяти флаконов (ампул) с туберкулином испытуемой серии с использованием стерильного физиологического раствора готовят три разведения: 1 : 1000; 1 : 200; 1 : 40, что должно соответствовать 1,0; 5,0 и 25,0 ME в 0,1 см3. Туберкулин в лиофилизированной форме предварительно растворяют в растворителе микобактериальных аллергенов до активности 10000 МЕ/см 3 по 8.4.

Для приготовления разведений стандарта туберкулина очищенного (ППД) для млекопитающих (эталонного образца) используют три ампулы. К содержимому ампулы добавляют 1 см 3 0,3%-ного раствора фенола в дистиллированной воде, получая при этом раствор туберкулина с активностью, указанной в паспорте стандарта (эталонного образца). Содержимое трех ампул стандарта (эталонного образца) смешивают и с использованием стерильного физиологического раствора готовят разведения, соответствующие активности 1,0; 5,0 и 25,0 ME в 0,1 см 3 .

8.15.1.2 Проведение испытания

У морских свинок удаляют волосяной покров на боках, дезинфицируют места инъекций 70 %-ным раствором этилового спирта и в условные точки (по методу латинского квадрата) вводят внутрикожно отдельными шприцами по 0,1 см 3 каждого разведения испытуемой пробы туберкулина и стандарта (эталонного образца). Морских свинок метят несмываемой краской.

8.15.1.3 Учет результатов

Реакцию у морских свинок учитывают через 24 — 28 ч путем измерения продольного и поперечного диаметров ответных реакций, образующихся в месте введения туберкулина, и вычисления среднего диаметра каждой ответной реакции.

Относительную активность R туберкулина испытуемой серии вычисляют, исходя из того, что между выраженностью ответной реакции и логарифмом дозы введения аллергена существует линейная зависимость [2].

Для вычисления логарифма относительной активности туберкулина IgR применяют формулу

где и — средний диаметр ответной реакции у морских свинок на одну дозу каждого введения;

ис — испытуемый туберкулин;

ст — стандарт туберкулина очищенного (ППД) (эталонный образец);

К — сумма слагаемых в числителе;

(d тахст d mincT )+(d тахис d тише )

b — усредненный тангенс угла наклона прямых зависимости диаметра ответной реакции от логарифма дозы туберкулина при графическом изображении результатов находят по формуле

где D — доза введения туберкулина.

где ис — испытуемый туберкулин;

ст — стандарт туберкулина очищенного (ППД) для млекопитающих (эталонный образец);

К — сумма слагаемых в числителе (для данного случая К = 3); b — для данного случая находят по формуле

(d 25 ст d 1ст ) + (d 25 ис

где d25ст _ средний диаметр на дозу 25 ME стандарта (эталонного образца);

dicT _ средний диаметр на дозу 1 ME стандарта (эталонного образца);

d25ис _ средний диаметр на дозу 25 ME испытуемого туберкулина;

dim _ средний диаметр на дозу 1 ME испытуемого туберкулина.

Средний диаметр реакции находят по формуле

В случае определения активности туберкулина очищенного (ППД) для млекопитающих логарифм относительной активности туберкулина IgR формула (5) принимает вид

где N — число животных в опыте;

di — отдельный диаметр ответной реакции.

Относительную активность R определяют по формуле

Величина относительной активности туберкулина должна равняться 1,00. Допускается отклонение величины R от 0,66 до 1,50 при доверительных границах эксперимента 50 % — 200 % (Р = 0,95) [1]. За доверительные границы условно принимают ± 2 стандартные ошибки при Р = 0,95. Стандартную ошибку m определяют по формуле

3 ) и не более 150 % (15000 МЕ/см 3 ) от предполагаемой активности (10000 МЕ/см 3 ). Активность туберкулина в лиофилизированной форме определяют после добавления растворителя микобактериальных аллергенов.

8.15.2 Определение активности туберкулина очищенного (ППД) для птиц

8.15.2.1 Подготовка к испытанию

За четыре — шесть недель до проведения испытаний сенсибилизируют морских свинок. Сенсибилизированные свинки могут быть использованы в течение 6 мес с интервалом не менее 30 сут между исследованиями.

Для сенсибилизации морским свинкам внутримышечно вводят 3 — 4 мг влажной массы живых микобактерий птичьего вида патогенного штамма, суспензированных в 0,5 см 3 стерильного физиологического раствора.

Из смеси содержимого пяти флаконов (ампул) с туберкулином испытуемой серии с использованием стерильного физиологического раствора готовят три разведения: 1 : 500; 1 : 100; 1 : 20, что должно соответствовать 5,0; 25,0 и 125,0 ME в 0,1 см3. Туберкулин в лиофилизированной форме предварительно растворяют в растворителе микобактериальных аллергенов до активности 25000 МЕ/см 3 по 8.4.

Для приготовления разведений стандарта туберкулина очищенного (ППД) для птиц (эталонного образца) используют три ампулы. К содержимому ампулы добавляют 1 см 3 0,3%-ного раствора фенола в дистиллированной воде, получая при этом раствор туберкулина с активностью, указанной в паспорте стандартного (эталонного) образца. Содержимое трех ампул стандарта (эталонного образца) смешивают и с использованием стерильного физиологического раствора готовят разведения, соответствующие активности 5,0, 25,0 и 125 ME в 0,1 см 3 .

8.15.2.2 Проведение испытания

Испытания проводят по 8.15.1.2.

8.15.2.3 Учет результатов

Учет и обработку результатов проводят по 8.15.1.3.

Величина относительной активности туберкулина должна равняться 1,00. Допускается отклонение величины R от 0,75 до 1,33 при доверительных границах эксперимента 50 % — 200 % (Р = 0,95) [1]. За доверительные границы условлено принимают ±2 стандартные ошибки при Р= 0,95.

Для выражения активности туберкулина в ME коэффициент относительной активности R умножают на предполагаемую активность (25000 МЕ/см 3 ).

Активность туберкулина очищенного (ППД) для птиц должна быть не менее 75 % (18750 МЕ/см 3 ) и не более 133 % (33250 МЕ/см 3 ) от предполагаемой активности (25000 МЕ/см 3 ). Активность туберкулина в лиофилизированной форме определяют после добавления растворителя микобактериальных аллергенов.

8.16 Определение специфичности

Исследованию подвергают каждую пятую серию туберкулина.

8.16.1 Определение специфичности туберкулина для млекопитающих

8.16.1.1 Подготовка к испытанию

Сенсибилизацию морских свинок проводят по 8.15.2.1.

Из смеси содержимого пяти флаконов (ампул) испытуемой пробы туберкулина с использованием стерильного физиологического раствора готовят два разведения с 25-кратным интервалом. Дозы испытуемого туберкулина очищенного (ППД) для млекопитающих 1000 и 40 ME в 0,1 см 3 стерильного физиологического раствора дают хорошо читаемые кожные реакции у морских свинок, сенсибилизированных М. avium.

Инъекционные дозы эталонного образца [стандарта туберкулина очищенного (ППД) для птиц] — в 20 раз ниже доз испытуемого туберкулина [туберкулина очищенного (ППД) для млекопитающих]: соответственно 50 и 2 ME в 0,1 см 3 стерильного физиологического раствора.

8.16.1.2 Проведение испытания

Испытания проводят по 8.15.1.2.

8.16.1.3 Учет результатов проводят по 8.15.1.3.

Специфичность S, %, рассчитывают по формуле

где R — относительная активность испытуемого туберкулина,

8.16.2 Определение специфичности туберкулина для птиц

8.16.2.1 Подготовка к испытанию

Сенсибилизация морских свинок по 8.15.1.1.

Для приготовления разведений туберкулин в лиофилизированной форме предварительно растворяют в растворителе микобактериальных аллергенов до активности 25000 МЕ/см 3 по 8.4.

Из смеси содержимого пяти флаконов (ампул) испытуемой пробы туберкулина с использованием стерильного физиологического раствора готовят два разведения с 25-кратным интервалом. Дозы испытуемого туберкулина очищенного (ППД) для птиц 500 и 20 ME в 0,1 см 3 стерильного физиологического раствора дают хорошо читаемые кожные реакции у морских свинок, сенсибилизированных М. bovis.

Инъекционные дозы эталонного образца [стандарта туберкулина очищенного (ППД) для млекопитающих] — в 20 раз ниже доз испытуемого туберкулина [туберкулина очищенного (ППД) для птиц]: соответственно — 25 и 1 ME в 0,1 см 3 стерильного физиологического раствора.

8.16.2.2 Проведение испытания по 8.15.1.2.

8.16.2.3 Учет результатов проводят по 8.16.1.3.

9 Транспортирование и хранение

Библиография

[1] European Pharmacopoeia, 7 th Edition, Strasbourg, 2020

[2] OIE Manual of Diagnostic Tests and Vaccines for Terrestrial Animals, 7 th Edition, 2020

[3] World Health Organization Expert Committee on Biological Standardization. Thirty-sixth Report. -Technical Report Series 745. World Health Organization, Geneva, 1988

УДК 619: 616.98:579.873.21-07 МКС 11.220

Ключевые слова: туберкулин очищенный (ППД) для млекопитающих, туберкулин очищенный (ППД) для птиц, диагностика, туберкулез, стерильность, реактогенность, сенсибилизирующие свойства, активность, специфичность, безвредность.

Подписано в печать 01.04.2020. Формат 60x84V₈.

Уел. печ. л. 2,33. Тираж 31 экз. Зак. 1708.

Подготовлено на основе электронной версии, предоставленной разработчиком стандарта

123995 Москва, Гранатный пер., 4. www.gostinfo.ru [email protected]

ТУБЕРКУЛИНЫ ОЧИЩЕННЫЕ (ППД) ДЛЯ ЖИВОТНЫХ Технические условия

Purified tuberculins (PPD) for animals.

Дата введения — 2020—01—01

1 Область применения

2 Нормативные ссылки

В настоящем стандарте использованы ссылки на следующие стандарты:

ГОСТ 12.1.008-76 Система стандартов безопасности труда. Биологическая безопасность. Общие требования

ГОСТ 177-88 Водорода перекись. Технические условия

ГОСТ 244-76 Реактивы. Натрия тиосульфат кристаллический. Технические условия ГОСТ 1277-75 Реактивы. Серебро азотнокислое. Технические условия

ГОСТ 4160-74 Реактивы. Калий бромистый. Технические условия ГОСТ 4204-77 Реактивы. Кислота серная. Технические условия ГОСТ 4232-74 Реактивы. Калий йодистый. Технические условия ГОСТ 4233-77 Реактивы. Натрий хлористый. Технические условия ГОСТ 4328-77 Реактивы. Натрия гидроокись. Технические условия ГОСТ 4457-74 Реактивы. Калий бромноватокислый. Технические условия ГОСТ 4459-75 Реактивы. Калий хромовокислый. Технические условия

ГОСТ 4919.1-77 Реактивы и особо чистые вещества. Методы приготовления растворов индикаторов

ГОСТ 6709-72 Вода дистиллированная. Технические условия

ГОСТ 7933-89 Картон для потребительской тары. Общие технические условия ГОСТ 9142-90 Ящики из гофрированного картона. Общие технические условия ГОСТ 12026-76 Бумага фильтровальная лабораторная. Технические условия ГОСТ 12301-2020 Коробки из картона, бумаги и комбинированных материалов. Общие технические условия

ГОСТ 12303-80 Пачки из картона, бумаги и комбинированных материалов. Общие технические условия

ГОСТ 14261-77 Кислота соляная особой чистоты. Технические условия ГОСТ ИСО/МЭК 17025-2020 Общие требования к компетентности испытательных и калибровочных лабораторий

Гост 17527-2020 Упаковка. Термины и определения

Гост 18300-87 Спирт этиловый ректификованный технический. Технические условия ГОСТ 18481-81 Ареометры и цилиндры стеклянные. Общие технические условия ГОСТ 22967-90 Шприцы медицинские инъекционные многократного применения. Общие технические требования и методы испытаний

ГОСТ 24861-91 (ИСО 7886-1-2020) Шприцы инъекционные однократного применения

ГОСТ 25336-82 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры

ГОСТ 28085-2020 Средства лекарственные биологические для ветеринарного применения. Метод бактериологического контроля стерильности

ГОСТ 29230-91 (ИСО 835-4-81) Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 4. Пипетки выдувные

ГОСТ 29251-91 (ИСО 385-1-84) Посуда лабораторная стеклянная. Бюретки. Часть 1. Общие требования

ГОСТ 31926-2020 Средства лекарственные для ветеринарного применения. Методы определения безвредности

ГОСТ 31929-2020 Средства лекарственные для ветеринарного применения. Правила приемки, методы отбора проб

3 Термины, определения и сокращения

3.2 В настоящем стандарте применены следующие сокращения:

ГЗТ — гиперчувствительность замедленного типа;

ППД — protein purified derivative (PPD);

ТХУ — трихпоруксусная кислота.

4 Классификация

Туберкулины выпускают в жидкой и лиофилизированной формах.

5 Условия выполнения испытаний и требования безопасности

5.1 Условия выполнения испытаний

5.1.1 Общие требования проведения микробиологического анализа и работы с микроорганизмами III — IV групп патогенности — по ГОСТ ISO 7218.

5.1.2 Общие требования к помещениям — по ГОСТ ISO 7218.

5.1.3 Требования к персоналу — по ГОСТ ISO 7218, ГОСТ ИСО/МЭК 17025.

К проведению испытаний допускаются квалифицированные сотрудники, имеющие опыт работы с микроорганизмами III — IV групп патогенности, изучившие методики микробиологических работ.

5.2 Требования безопасности

5.2.1 По биологической безопасности туберкулины должны соответствовать требованиям ГОСТ 12.1.008.

5.2.2 Требования к обучению персонала безопасности труда — по ГОСТ 12.0.004.

6 Технические требования

5.1.3 Требования к персоналу — по ГОСТ ISO 7218, ГОСТ ИСО/МЭК 17025.

Туберкулин очищенный (ППД) для млекопитающих

СОСТАВ

Туберкулин изготовлен из белковой фракции продуктов роста и термического разрушения возбудителя туберкулеза бычьего вида, выращенного на синтетической питательной среде.

НАЗНАЧЕНИЕ
Предназначен для аллергической диагностики туберкулеза у крупного рогатого скота, верблюдов, буйволов, оленей, свиней, коз, овец, пушных зверей и других млекопитающих.

ПРИМЕНЕНИЕ
Препарат используют для внутрикожной, глазной и внутривенной туберкулинизации.

ФОРМА ВЫПУСКА
Препарат выпускается в лиофилизированном виде и в виде стандартного раствора, готового к применению. Стандартный раствор выпускают во флаконах вместимостью 20 мл по 100 доз (20 мл) во флаконе. Лиофильно высушенный препарат расфасовывают во флаконы вместимостью 20 мл по 100 доз препарата. В коробке 20 флаконов препарата. Для растворения сухого туберкулина выпускается растворитель микобактериальных аллергенов.

ХРАНЕНИЕ
Препарат сохраняет свои свойства в течение 3 лет при хранении в закрытом сухом месте при температуре от 2 до 8 0 С.

НАЗНАЧЕНИЕ
Предназначен для аллергической диагностики туберкулеза у крупного рогатого скота, верблюдов, буйволов, оленей, свиней, коз, овец, пушных зверей и других млекопитающих.

Адвантикс — препарат для животных

Что содержится в «Адвантиксе»

Действие «Адвантикса»

Способ применения

ГОСТ 32306-2020 Туберкулины очищенные (ППД) для животных. Технические условия

Текст ГОСТ 32306-2020 Туберкулины очищенные (ППД) для животных. Технические условия

1 Область применения

2 Нормативные ссылки

3 Термины, определения и сокращения

4 Классификация

5 Условия выполнения испытаний и требования безопасности

6 Технические требования

7 Правила приемки

8 Методы испытания

9 Транспортирование и хранение

Библиография

ГОСТ 32306-2020
Туберкулины очищенные (ППД) для животных. Технические условия

Способы доставки

Оглавление

Этот ГОСТ находится в:

Организации:

Purified tuberculins (PPD) for animals. Specifications

Нормативные ссылки

ТУБЕРКУЛИНУ ОЧИЩЕННЫЕ (ППД) ДЛЯ ЖИВОТНЫХ

Технические условия

Предисловие

9 Транспортирование и хранение

Библиография

1 Область применения

2 Нормативные ссылки

3 Термины, определения и сокращения

4 Классификация

5 Условия выполнения испытаний и требования безопасности

6 Технические требования

Туберкулин очищенный (ППД) для млекопитающих