Способы Определения Заболевания Животных

Способы Определения Заболевания Животных

При подозрении на инфекционную болезнь в хозяйстве основная задача врача-эпизоотолога — своевременно установить диагноз, используя комплексный метод диагностики.

Аллергическая проба (внутрикож-ная, глазная, подкожная) серологический (РА, РГА, РНГА, РТГА, РТНГА, ККРА, ККРНГА, РСК, РДСК, РИФ, РЗГАд, РНГАд, РП, РДП, РН, ‘ РИД, РБП, РИА, . ИФА, РФ, РИЭОФ, КР с молоком, РБП)

Комплексный метод диагностики инфекционных болезней

Микроскопия (световая, люминесцентная)

Микроскопия (люминесцентная, световая, электронная)

Выделение вируса биопроба

Примечание. Для каждой болезни существует перечень показателей, по которым диагноз считают установленным.

Благодаря правильному и своевременному диагнозу удается обеспечить эффективность оздоровительных мероприятий, т. е. быстро купировать возникший эпизоотический очаг и предупредить дальнейшее распространение болезни.

Эпизоотологический метод. Представляет собой систему изучения проявлений эпизоотического процесса. Для характеристики последнего необходимо собрать точную информацию о восприимчивых видах, источнике и резервуаре возбудителя болезни, механизме его передачи, воротах инфекции, интенсивности проявления эпизоотического процесса, сезонности, предрасполагающих факторах, заболеваемости, смертности, летальности. Кроме того, особое внимание обращают на факторы, определяющие пути дальнейшего распространения заболевания — выполнение противоэпизоотических мероприятий и условия внешней среды.

Чтобы охарактеризовать эпизоотическое состояние хозяйства, сопоставляют и оценивают обобщенные эпизоотологические показатели, получаемые путем статистической обработки данных первичного учета заболеваний и профилактических мероприятий.

Клинический метод. При клиническом исследовании животных, подозреваемых в заболевании инфекционной болезнью, необходимо всегда строго соблюдать правила работы, предусмотренные соответствующей инструкцией.

Клиническое исследование рекомендуют начинать с измерения температуры тела животного. Далее осматривают животное в нефиксированном состоянии: обращают внимание на положение тела реакцию на различные раздражители, прием корма и воды, характер фекалий, особенности дефекации и мочеиспускания. Затем приступают к исследованию отдельных систем и органов по схеме, общепринятой в клинической диагностике болезней.

Клинические признаки инфекционной болезни зависят от многих факторов: вида и локализации возбудителя, течения, формы проявления и стадии болезни, резистентности организма и других причин. Во всех случаях клинические признаки одной и той же инфекционной болезни у животных даже одного вида сильно варьируют.

Патоморфологический метод. Включает в себя патологоанатомический и гистологический методы исследований. Патологоанатомический метод считают важным, но не всегда окончательным методом диагностики. Например, если при вскрытии трупа животного (птицы) отмечают характерные изменения — туберкулы, то сразу же диагностируют туберкулез, при обнаружении в селезенке свиньи краевых геморрагических инфарктов — чуму, кровоизлияний на границе мышечного и железистого желудка у кур — болезнь Ньюкасла и т. д.

Порядок патологоанатомического исследования: оценивают состояние трупа, кожи и слизистых оболочек, затем исследуют лимфатическую систему, серозные покровы, мышцы и суставы, органы дыхания, сердце и кровеносные сосуды, печень, селезенку, почки, глотку, пищевод, желудок, тонкий кишечник, толстый кишечник, мочевой пузырь, органы воспроизводства, головной и спинной мозг.

Однако во многих случаях наряду с патологоанатомическим применяют и метод лабораторных исследований (гистологических, бактериологических и др.). С помощью гистологического метода устанавливают точный диагноз при таких болезнях, как — бешенство (тельца Бабеша—Негри), ринопневмония (внутриядерные включения типа Коудри), оспа (тельца-включения).

Бактериологический метод. Это ценный метод диагностики инфекционных болезней. Для бактериологического исследования от больных или павших животных необходимо правильно взять патологический материал и грамотно оформить сопроводительный документ. Поступивший биоматериал обрабатывают в зависимости от предполагаемой болезни, делают мазки-отпечатки, красят их соответствующими методами, выделяют чистую культуру посевом на питательные (элективные) среды, заражают чувствительных лабораторных животных биоматериалом или выделенной чистой культурой (табл.1).

1. Бактериологический метод диагностики некоторых инфекционных болезней

На основании обнаружения патогенных микроорганизмов в поступившем материале устанавливают этиологический диагноз.

Вирусологический метод. Для вирусологического исследования в лабораторию направляют патологический материал от больных животных, взятый в период проявления у них клинических признаков (температурная реакция, угнетение, воспалительные процессы в верхних дыхательных путях, сопровождающиеся серозными или слизистыми истечениями из носовой полости, диарея, образование везикул, афт, иногда аборты), или вынужденно убитых (павших) животных, взятый не позднее чем через 2 ч после их гибели. Вирусологический метод диагностики включает в себя: обнаружение возбудителя в патологическом материале различными методами (электронная, люминесцентная или световая микроскопия, заражение культуры клеток, лабораторных животных и т. д.), выделение и идентификацию вируса в различных серологических реакциях, биопробу.

Гематологический метод. В лабораторию для гематологического исследования отправляют кровь, которую берут с соблюдением правил асептики из яремной вены в пробирки с антикоагулянтом— 10 %-м раствором трилона Б, гепарина, цитрата натрия из расчета 0,02 мл раствора на 1 мл крови.

Гематологический метод используют как вспомогательный, а при некоторых инфекционных болезнях (лейкоз крупного рогатого скота, инфекционная анемия лошадей) — в качестве основного метода диагностики. При лейкозе крупного рогатого скота диагноз основан на обнаружении в периферической крови повышения содержания лейкоцитов основного лимфоидного ряда в 1-10-3 мл крови, а при инфекционной анемии лошадей — на основании снижения содержания эритроцитов в 1 • 103 мл крови, гемоглобина и замедленной скорости оседания эритроцитов (СОЭ).

Иммунологический метод. Включает в себя серологическую диагностику — в лаборатории исследуют сыворотки крови для обнаружения антител и аллергическую пробу, с помощью которой в хозяйствах выявляют животных, больных туберкулезом, паратуберкулезом, бруцеллезом, сапом, реже — сибирской язвой, листериозом, туляремией.

Клинический метод. При клиническом исследовании животных, подозреваемых в заболевании инфекционной болезнью, необходимо всегда строго соблюдать правила работы, предусмотренные соответствующей инструкцией.

Методы лабораторной диагностики инфекционных заболеваний животных

Радюк Екатерина Васильевна – врач-лаборант ИВЦ МВА

Инфекционные заболевания весьма часто встречаются в ветеринарной практике. Для владельца животного важно вовремя обратить внимание на симптомы недомогания питомца. Для большинства инфекционных заболеваний эти симптомы неспецифичны: угнетение, отказ от корма, повышенная температура тела, рвота, понос; при некоторых заболеваниях встречается хромота и опухание суставов; возможно изменение цвета мочи.

Для ветеринарного врача, к которому приводят заболевшее животное, важно составить список дифференциальных диагнозов и исключить (или подтвердить) их специальными методами диагностики. Однако стоит помнить, что выбор диагностического метода будет зависеть от вида возбудителя, его локализации и стадии заболевания. Методика, применимая для диагностики одной инфекции, совершенно неприемлема для диагностики другой.

В данной статье представлен обзор основных методов диагностики инфекционных заболеваний, которыми располагает современная ветеринарная медицина.

1. Культивирование

Целью данного метода является изоляция возбудителя и получение его чистой культуры на специальной среде в оптимальных условиях. Наряду со световой микроскопией культивирование микроорганизмов является «классическим» методом диагностики. Успешное выделение и культивирование возбудителя из клинического материала позволяет подтвердить этиологию заболевания на ранних сроках до появления специфических антител и идентифицировать возбудитель. Однако у этого метода есть свои, достаточно значимые для клинической практики, ограничения.

Возбудители многих заболеваний, как правило, достаточно требовательны к питательным средам и достаточно сложны для культивирования invitro. Не для всех возбудителей определены условия культивирования. В некоторых случаях используют синтетические или полусинтетические среды – однако при этом рост возбудителей очень медленный (до нескольких месяцев) и всегда присутствует значительный риск грибковой или бактериальной контаминации, несмотря строгое соблюдение асептики. Кроме того, проведение работ по культивированию возможно только в специализированных микробиологических лабораториях. Поэтому в ветеринарии данный метод не нашел широкого применения при диагностике инфекционных заболеваний; работы, связанные с культивированием возбудителей, проводятся, как правило, только в специальных исследовательских институтах с целью их более детального изучения и разработки диагностических тест-систем.

2. Световая микроскопия

1) Микроскопия фиксированных окрашенных препаратов

Является наиболее доступным и потому распространенным методом диагностики инфекционных (особенно трансмиссивных) заболеваний в ветеринарной медицине. Основан на выявлении возбудителя в клиническом материале по характерной морфологии. Однако, несмотря на свою простоту и доступность, у этого метода есть свои недостатки.

Во-первых, у метода световой микроскопии достаточно ограниченная чувствительность. При незначительном количестве возбудителей в материале результат микроскопии может быть отрицательным.

Во-вторых, необходимо тщательное приготовление и окраска мазков для минимизации возможных артефактов.

В-третьих, лаборанту или врачу, интерпретирующему мазок, требуется достаточный опыт и хорошее знание морфологии как клеток тканей, так и возбудителей и умение отличать последних от возможных рефракционных артефактов или преципитатов красителя. И, в-четвертых, точное определение вида возбудителя при использовании только световой микроскопии возможно далеко не всегда. Поэтому световую микроскопию стараются дополнять другими методами диагностики, основанными на обнаружении специфических антител либо генетического материала возбудителя.

2)Темнопольная микроскопия

Вид оптической микроскопии, в которой контраст изображения увеличивают за счет регистрации только света, рассеянного изучаемым образцом. Как правило, используется для обнаружения спирохет — боррелий и лептоспир. Из-за необходимости наличия специального оборудования в рутинной ветеринарной практике применяется редко. Кроме того, с помощью темнопольной микроскопии невозможно определить видовую принадлежность возбудителя и его патогенность.

3. Полимеразная цепная реакция (ПЦР)

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – это метод ферментативного получения ампликонов (большого количества копий) исследуемых фрагментов ДНК путем повторных циклов репликации и денатурации (разделения цепи ДНК на отдельные нити); при этом происходит копирование только исследуемого участка ДНК (при условии его присутствия в данном образце), поскольку только этот участок соответствует заданным условиям.

Метод ПЦР идеально подходит для обнаружения микроорганизмов, трудно визуализирующихся, медленно растущих или сложных в культивировании. ПЦР является наиболее предпочтительным методом для диагностики заболевания в острый период. Основным лимитирующим фактором при использовании ПЦР является содержание в исследуемой пробе достаточного количества материала (нуклеиновой кислоты возбудителя). Для многих возбудителей известно, что их количество в крови меняется с течением времени; таким образом, в какой-то момент времени ПЦР может показать ложноотрицательный результат у инфицированного пациента. Таким образом, для врача крайне важно знать тропность возбудителя к тканям организма и отправлять на исследование тот материал, в котором вероятность обнаружения возбудителя наиболее высока (например, мочу – при диагностике лептоспироза, плаценту или пунктат семенников при подозрении на бруцеллез, синовиальную жидкость — при исследовании на боррелиоз).

К техническим недостаткам этого метода можно отнести возможность ложноотрицательных результатов из-за присутствия ингибиторов реакции в пробе, а также возможность ложноположительных результатов вследствие контаминации. Кроме того, данный метод не всегда подходит для оценки эффективности лечения, поскольку ПЦР выявляет как живые микроорганизмы, так и их «останки».

4. Серологические методы диагностики

Данные методы основаны на выявлении у животных специфических антител. Заражение инфекционным агентом, если оно происходит впервые, в течение недели вызывает у животного умеренный рост иммуноглобулинов класса М (IgM) и постепенное увеличение иммуноглобулинов класса G (IgG), которое достигает пика через 14 дней. Определение уровня антител у животных с остро начинающимся заболеванием (таким как бабезиоз) дает мало полезной диагностической информации. Для диагностики хронических заболеваний (например, моноцитарного эрлихиоза) измерение уровня антител будет более полезным.

Продукция антител у каждого животного может сильно варьироваться; этот процесс зависит от возраста, иммунного статуса и генетической принадлежности. Лучший способ оценки степени сероконверсии заключается в исследовании парных сывороток, взятых с интервалом в 2-3 недели. Растущий титр антител указывают на недавнюю и, следовательно, клинически значимую инфекцию, особенно если это подтверждается соответствующими клиническими признаками. Альтернативным методом определения недавней инфекции является измерение уровня IgM, однако в ветеринарной практике данный метод практически не используется.

1) Твердофазный иммуноферментный анализ (ИФА, ELISA)

Принцип метода заключается в том, один их специфических реагентов (антиген) иммобилизуют на твердой фазе. Затем последовательно добавляют другие специфические реагенты, проводя после инкубации каждого из них промывку с целью удаления несвязавшихся компонентов. Один из специфических реагентов, так называемый конъюгат, содержит ферментную метку. Для визуализации результата в конце реакции добавляют хромогеновый субстрат. Через определенный промежуток времени реакцию останавливают и проводят считывание на спектрофотометре.

Для определения титра антител в сыворотке готовят несколько последовательных разведений; титр антител определяется как обратный последнему видимому разведению (к примеру, если последнее разведение было 1:2020, то титр антител составит 2020). Метод твердофазного ИФА является наиболее предпочтительным для определения наличия антител к возбудителям, антигены которых легкодоступны (т.е. это либо легко культивируемые микроорганизмы, либо те, для которых получены рекомбинантные антигены). Кроме того, он может использоваться и для выявления антигенов возбудителя – например при диагностике инвазии Dirofilariaimmitisили вируса лейкемии кошек.

Для использования полноценного твердофазного иммуноферментного анализа необходимо наличие специального лабораторного оборудования. Однако существует экспресс-модификация ИФА (SNAP, IDEXX Laboratories), где антиген/антитела иммобилизированы не на плашке, а на мембранном фильтре. Эти тесты широко используются в клиниках для диагностики трансмиссивных заболеваний (лейшманиоза, дирофиляриоза, анаплазмоза, эрлихиоза и боррелиоза). Однако они не дают возможность зафиксировать рост или снижение титра антител, а также определить их принадлежность к M или G классу.

2) Метод флюоресцирующих антител (МФА, IFA)

В случае, когда культивирование микроорганизма сопряжено с техническими сложностями либо небезопасно, применяют метод иммунофлюоресценции. При этом может быть обнаружен как сам организм в зараженных клетках и тканях пациента (прямой МФА) либо наличие в сыворотке специфичных антител (непрямой МФА). В непрямом МФА зараженные клетки (как правило, культурального происхождения) зафиксированы на предметных стеклах либо планшетках. Сама процедура исследования схожа с таковой в ИФА. Однако в конъюгате вместо фермента здесь используется специальный краситель, дающий при определенной длине волны флюоресцентное свечение, которое можно видеть в специальный микроскоп. Количество антител также определяется по последнему разведению, давшему положительный результат.

Прямой МФА считается менее чувствительным; используется в тех случаях, когда число зараженных клеток невелико (например, для выявления в мазках крови морул Anaplasmaphagocytophilum).

3) Иммуноблот (вестерн-блот)

Представляет собой метод, при котором возможна визуализация взаимодействия антител с каждым антигеном в отдельности. Антигены возбудителя отделяются друг от друга с помощью электрофореза, а затем в виде полос наносятся на специальную мембрану (обычно нитроцеллюлозную). Дальнейшие стадии аналогичны таковым в ИФА. Для детекции результатов обычно используют иммунопероксидазный метод; при этом комплексы антиген-антитело визуализируются как отдельные темные полосы. Таким образом, можно понять, на какие именно антигены возбудителя в организме животного выработались антитела. Наибольшее значение метод иммуноблоттинга имеет при диагностике клещевого боррелиоза (болезни Лайма), поскольку метод ИФА при этом часто дает ложноположительные результаты. Кроме того, этот метод считается «золотым стандартом» при диагностике вирусного иммунодефицита кошек.

4) Иммунохроматография (ИХА, «экспресс-тесты»)

По этому принципу сделано большое количество «быстрых тестов», широко используемых в ветеринарных клиниках. Полученная от животного сыворотка наносится на мембрану, содержащую связанный с молекулами золота антиген. Специфичные антитела в сыворотке связываются с антигеном; образовавшийся в результате комплекс антиген-антитело продвигается с током жидкости по тестовой зоне, пока не достигнет матрикса, который его связывает. Данный комплекс выглядит как розовая полоса в зоне преципитации. Аналогично выглядит положительный контроль. Результат, выдаваемый тестами, как правило, является качественным – то есть нарастание или снижение уровня антител по ним отследить невозможно. Некоторые тесты (например, для диагностики парвовирусного и коронавирусного энтерита, лейкемии кошек, сердечного дирофиляриоза) выявляют наличие в сыворотке соответствующего антигена – в таком случае результат является качественным.

Таким образом, в статье были рассмотрены основные методы, применяемые сегодня для диагностики инфекционных заболеваний животных. Особое внимание хотелось бы уделить тому, что не существует какого-либо универсального метода для диагностики того или иного заболевания. Поэтому от врача при постановке диагноза требуется комплексный подход; необходимо учитывать анамнез, длительность заболевания, клинические признаки и данные общих лабораторных исследований.

Кроме того, необходимо умение правильно интерпретировать результаты – ведь даже обнаружение антител (особенно класса G) к тому или иному возбудителю не говорит о том, что именно этот этиологический агент является причиной нынешнего состояния животного. Только грамотное применение и интерпретация специальных методов исследования (не только при диагностике трансмиссивных заболеваний) в сочетании с клинической картиной дает возможность правильно поставить диагноз и назначить адекватное лечение.

В данной статье представлен обзор основных методов диагностики инфекционных заболеваний, которыми располагает современная ветеринарная медицина.

Методы диагностики болезней животных

Предпосылки успешного проведение исследования больного животного для постановки диагноза. Методы клинического исследования. Особенности исследования крови, методы иммуноферментного анализа и патологоанатомической диагностики. Вскрытие трупов животных.

Отправить свою хорошую работу в базу знаний просто. Используйте форму, расположенную ниже

Студенты, аспиранты, молодые ученые, использующие базу знаний в своей учебе и работе, будут вам очень благодарны.

Исследование выпотных жидкостей. Жидкости, которые скапливаются в полостях организма, делят на экссудаты и транссудаты в зависимости от их происхождения. Если в их основе лежит воспалительный процесс то это экссудат (серозный, фибринозный, гнойный, гнилостный). Наличие выпота невоспалительного характера, состоящего практически из сыворотки крови, пропотевающей через сосудистую стенку при отечном синдроме или выраженной недостаточности кровообращения, свидетельствует о скоплении транссудата.

Выпотную жидкость получают для исследования посредством прокола или грудной стенки (торакоцентеза), или пробного прокола живота. Его выполняют по всем правилам хирургической техники специальной иглой или троакаром, которые снабжены краном, чтобы в плевральную полость не попал воздух. Можно воспользоваться и обыкновенной иглой, соединенной со шприцем.

Полученную выпотную жидкость помещают в чистую, сухую посуду, добавляют стабилизаторы (цитрат натрия — 1 мг/мл, гепарин) и подвергают исследованию. При этом определяют физические свойства (цвет, прозрачность, относительная плотность), проводят химическое исследование (рН, количество белка и глюкозы, проба Ривальты), микроскопию и бактериологическое исследование.

Транссудат представляет собой бесцветную или слегка желтоватую, прозрачную жидкость, водянистой консистенции, без запаха, слабощелочной реакции. Относительная плотность жидкости колеблется от 1,002 до 1,015 г/мл. Содержание белка в транссудате не превышает 25 г/л (2,5%), глюкозы — более 3 ммоль/л, проба Ривальты отрицательная, осадок незначительный. Транссудаты появляются вследствие следующих причин: изменений сосудистых стенок; повышения капиллярного давления; гидремических изменений.

Экссудаты образуются в результате воспалительных процессов. Цвет зависит от типа воспаления, жидкость мутная, вязкая и густая, часто с неприятным гнилостным запахом. Относительная плотность экссудата больше 1,015 г/мл, концентрация белка более 25-30 г/л (2,5-3,0%), глюкозы — менее 3 ммоль/л. Проба Ривальты положительная, обильный осадок, в мазках много лейкоцитов и эритроцитов.

Проба Ривальты используется для экспресс-дифференциации экссудатов от транссудатов. Принцип основан на том, что экссудаты содержат серомуцин — вещество глобулиновой природы, которое и дает положительную реакцию. Постановка пробы: в цилиндр со 100 мл дистиллированной воды, подкисленной 2-3 каплями концентрированной уксусной кислоты, добавляют 1-2 капли исследуемой жидкости. Если образующееся беловатое облачко опускается до дна цилиндра — проба положительная (экссудат), если облачко растворяется — отрицательная (транссудат).

Кал в ветеринарной лабораторной практике исследуют по следующей схеме: макроскопическое и микроскопическое исследование; химический анализ; паразитологическое и бактериологическое исследование.

Макроскопически оценивают количество, консистенцию и форму каловых масс, их цвет и запах, а также наличие примесей и остатков непереваренного корма. Количество кала зависит от съеденного корма, а также от содержания в нем клетчатки. Так, у здорового крупного рогатого скота за сутки выделяется от 15 до 35 кг кала, у лошади — 15-20 кг, у мелкого рогатого скота и свиней — 1-3 кг, у собак — 0,2-0,5 кг. Количество кала увеличивается при быстром прохождении пищевой массы через кишечник в результате усиления перистальтики, при нарушении всасывания, при воспалительных процессах. Уменьшение кала наблюдается при запорах, химо- и копростазе.

Консистенция и форма каловых масс зависит от вида и возраста животных. При патологических процессах кал может быть плотным, жидким, водянистым или пенистым. Цвет кала зависит, главным образом, от вида принимаемого корма и внешнесекреторной функции печени. Следует также иметь ввиду, что некоторые препараты могут изменять цвет кала (висмут, уголь, препараты железа, метиленовая синь). При нарушении желчеотделения кал приобретает сероватый или глинистый цвет, который хорошо выражен у молодняка. При кровотечении в толстом кишечнике кал окрашивается в ярко-красный, вишневый цвет, а при кровотечении в желудке или тонком кишечнике он становится темно-коричневым.

Микроскопическим исследованием устанавливают переваривающую способность органов пищеварения. Отыскивают различные включения, свидетельствующие о патологическом процессе (гной, кровь, клетки эпителия и проч.); наличие различных микроорганизмов; наличие гельминтов, паразитирующих в кишечнике и др. органах.

Чтобы оценить переваривающую способность кишечника и др. органов системы готовят три препарата: нативный (не окрашивают, определяют растительный клетки, эпителий, простейших, яйца гельминтов и др.); окрашенный раствором Люголя для обнаружения крахмала (у здоровых животных крахмал в кале отсутствует и не дает никакой окраски, если крахмал не ращепляется вообще, то окрашивается в сине-черный цвет, частично ращепленный — имеет цвет от фиолетового до красно- бурого); окрашенный раствором Саатгофа, а также реактивом Гехта для обнаружения нейтрального жира (у здоровых животных в кале нейтрального жира практически нет и кал не окрашивается, положительная проба на жир — появление ярко-красного цвета). Стеаторея развивается при недостатке липазы и недостаточном поступлении в кишечник желчи, что приводит к мальдигестии и мальабсорбции. Кал при этом неоформленный, мазевидной консистенции.

При химическом исследовании устанавливают рН, наличие в кале скрытой крови, желчных пигментов, белка, а также определяют активность ферментов. Целью бактериологического исследования является обнаружение различных микробов, но поскольку их довольно трудно дифференцировать, то микрофлору окрашивают по Граму. Б мазках у здоровых телят обнаруживают 60-90% грамположительных и 10-40% грамотрицательных бактерий. При простой, а тем более при токсической диспепсии количество грамотрицательной микрофлоры возрастает до 70-90%.

Методы иммуноферментного анализа в диагностике болезней животных

Иммуноферментный анализ (ИФА) — относится к группе иммунохимических методов биохимического исследования. Метод основан на специфическом взаимодействии антитела (Am) с антигеном (Аг) — специфические компоненты реакции. Б разных вариантах постановки метода аг или ат, попомечается так называемой ферментной меткой. Последняя представляет собой очищенный фермент высокой активности, присоединенный посредством физико-химического взаимодействия к молекуле am или аг.

Фермент используется для визуализации иммунного взаимодействия. На последнем этапе постановки реакции добавляется субстрат, на который воздействует фермент с образованием специфического продукта. Еще одним принципиальным условием постановки метода является отделение, образующегося иммунного комплекса от других составляющих реакционной среды. Это достигается, как правило, адсорбцией одного из специфических компонентов реакции на каком-то носителе (чаще всего на материале из которого изготовлена емкость, в которой ставится реакция). Затем посредством отмывания от мешающих компонентов в реакционной среде остается только искомый иммунный комплекс, с ферментной меткой к которому добавляется субстрат.

Теоретически метод основывается на одном из фундаментальных законов химии — законе действия масс. Применительно к данному методу используется частный вывод из закона — количество меченого антигена, связавшегося с антителами будет обратно пропорционально количеству определяемого антигена:

К- константа равновесия обратимой реакции,

[Аг] — концентрация антигена;

[Ат] — концентрация антитела;

[Аг-Ат] — концентрация комплекса антиген-антитело.

Б состоянии равновесия отношение связанного антигена (Б) к свободному (F) определяется соотношением:

B/F= [Аг*Ат ]/[Агисх]- [Агсв ], где

[Агисх] — исходная концентрация антигена;

[Агсв ] — количество антигена, связанного в виде комплекса Аг*Ат.

Меченый антиген ведет себя так же, как и немеченый, и отношение концентрации связанного антигена и свободного описывается тем же уравнением.

Отсюда следует, что если концентрация немеченого антигена Аг (определяемого агента) будет увеличена при постоянной концентрации меченого антигена (Аг), то первый связывает большее число антител. Б результате концентрация связанного меченого антигена (Аг х Ат) снизится и отношение связанного меченого антигена к свободному (B x /F x ) будет уменьшаться с увеличением в инкубационной смеси немеченого (определяемого) антигена. Поэтому отношение B x /F x является количественной характеристикой определяемого антигена.

Метод ИФА является историческим продолжением радиоиммунологического метода (РИА) широко используемого для определения концентрации гормонов и до настоящего времени. Методы ИФА были разработаны в начале 70-х годов XX века. Метод иммуноферментного анализа имел ряд преимуществ перед методом радиоиммунологического анализа.

1. Б нем не использовались радиоактивные изотопы. Отсутствие радиационной опасности значительно упрощает условия проведения реакции.

2. Меченые соединения, используемые в ИФА более устойчивы и постоянны (в РИА они устойчивость зависит от периода полураспада изотопов.)

3. Возможность быстрого определения результатов ферментативной реакции с помощью обычных общедоступных приборов (фотометров). Возможность даже визуальной оценки реакции.

4. ИФА легко поддается автоматизации.

Чувствительность и специфичность ИФА определяется качеством иммунной сыворотки. Необходимо использовать только высокоавидные и высоко специфические антитела. В настоящее время качественный иммуноферментный диагностикум должен изготавливаться на основе моноклональных Am.

Принципиально следует разделять методы ИФА на вида: конкурентный ИФА и неконкурентный ИФА. Б первом случае в реакционную смесь вносят заранее известное количество меченого Аг или Am, которые в соответствие с законом действия масс конкурируют за специфическое взаимодействие с Аг или Am, находящимся в исследуемом материале. При неконкурентном методе происходит отделение продукта специфической иммунной реакции — комплекса Аг-Ат и проведение последующей специфической реакции с меченным Am к этому комплексу. Конкурентный вариант ИФА используется в большей степени для определения концентраций веществ, а неконкурентный метод — это метод полуколичественного определения веществ и расчет концентрации в данном случае проводится по титру или в условных единицах измерения. Неконкурентный вариант ИФА используется для выявления сложных Аг или Am, с множеством антигенных детерминант, таких возбудители инфекционных заболеваний, или антетала к возбудителям инфекционных и паразитарных заболеваний.

Так же метод ИФА по технике постановки реакции разделяют на гомогенный ИФА (EMJT) в котором образовавшийся при взаимодействии иммунный комплекс не отделяется от других компонентов реакции и твердофазный (ELISA) — в этом случае Аг или Am иммобилизировано на твердом носителе (пробирке, стенке полистеролловой лунке и т.д.).

Методом ИФА может быть определено любое вещество, которое вступает в специфическое иммунно-химическое взаимодействие и на которое или на образовавшийся иммунный комплекс в организме продуценте иммунных тел развивается иммунитет.

ИФА в ветеринарной практике используют в следующих направлениях.

1. Диагностика инфекционных и паразитарных заболеваний. Она может основываться на определении концентрации Am к возбудителям заболеваний в сыворотке крови или на определении в органах и тканях Аг (то есть непосредственно возбудителя). Производителями из различных стран выпускается большой спектр диагностикумов для диагностики различных заболеваний крупного рогатого скота, птицы, свиней и др. видов животных. Наиболее распространенными в нашей стране диагностикумами для ИФА являются диагностикумы производства: ФГУ «ВНИИЖЗ» (Россия) — наборы для диагностики инфекционных заболеваний птиц (ИБК, БГ, ИББ, микоплазмоза птиц, сальмонеллеза, ССЯ-76 и др.); Sinbiotic (США) — так же наборы для диагностики инфекционных заболеваний птиц; AideX (США) — наборы для диагностики инфекционных заболеваний крупного рогатого скота, свиней и птиц (в том числе — для диагностики лейкоза крупного рогатого скота, классической чумы свиней, РРС); НПФ «Нарвак» — наборы для диагностики инфекционных заболеваний кошек (панлейкемии), — собак (чума собак, инфекционный гепатит и др.), — крупного рогатого скота (вирусной диареи, ИРТ и др.), — свиней (КЧС, РРС, парвовирусной инфекции и др.), — птиц.

2. Гормонодиагностика — определение концентрации гормонов для диагностики эндокринных заболеваний, глубоких нарушений обмена веществ и нарушений воспроизводительной функции. Разработаны методы определения гормонов, как белковой природы, так и стероидной. При этом определяются как основные формы гормонов, так и промежуточные их метаболиты. Наиболее часто в ветеринарной практике определяются концентрация прогестерона, тестостерона, эстрадиола и его метаболитов, трийод- и тетрайодтиронина.

3. Определение остаточных количеств лекарственных препаратов и токсических соединений в животноводческой продукции. Разработаны методы определения антибиотиков и микотоксинов.

4. Определение микотоксинов в кормах для животных с целью определения пригодности к скармливанию. ФГУ «НИИ ветеринарной санитарии» (Россия) разработаны и производятся наборы для определения концентрации микотоксинов (зерааленона, ДОНа, афлатоксинов и др.). Эти наборы широко используются в ветеринврных лабораториях Республики, наставления по их применению утверждены.

Методы патологоанатомической диагностики животных. Порядок и методика вскрытия трупов животных

Б животноводческих помещениях вскрывать трупы строго запрещается. Вскрытие производят на специальных площадях и в помещениях, расположенных возле биотермических ям. На месте вскрытия полы должны быть бетонированными или асфальтированными с наличием люка, закрываемого крышкой, для сброса частей расчлененного трупа в биотермическую яму. Вскрытие трупов животных проводится в специальных помещениях — секционных залах (прозекториях), которые имеются в учебных заведениях, ветеринарных лабораториях, на утилизационных заводах.

При проведении вскрытия необходимы: средства для дезинфекции рук (2-3%-ный раствор карболовой или уксусной кислоты, 4%-ный раствор формалина); для дезинфекции места вскрытия — хлорная известь, 10%-ный раствор продажного формалина или 10%-ный горячий раствор едкого натра.

Вскрытие желательно производить при дневном свете, чтобы точно определить окраску тканей и органов.

Для вскрытия трупов животных необходимо иметь анатомический набор инструментов: ножи для снятия кожи и разрезания органов и тканей, кишечные ножницы для вскрытия полостных органов, малые ножницы для разрезания кровеносных сосудов и различных протоков, анатомический и хирургический пинцеты, реберные ножницы для разрезания ребер у мелких животных, лучковая пила для распиливания ребер и других костей у крупных животных, долото для вскрытия черепа, молоток- топорик и щипцы-костодержатели. Кости разрубают топором. В наборе должен быть брусок для заточки ножей. Для оттягивания отрезанных органов, грудной и брюшной стенки желательно иметь крючки с ручками.

Необходимо иметь предметные стекла, стеклянные банки и эмалированные ведра с крышками.

При вскрытии трупов ветеринарный специалист обязан строго выполнить ветеринарно-санитарные правила, предупреждающие распространение возбудителей заразных болезней животных, а так же человека, загрязнение животноводческих ферм, водоемов, пастбищ, обеспечивающие безопасность самого вскрывающего, его помощников, обслуживающего персонала.

Курение, прием пищи и воды во время вскрытия запрещаются. Лица, участвующие во вскрытии трупа, должны быть ознакомлены с техникой безопасности.

Вскрывать трупы необходимо в спецодежде. Вскрывающий должен иметь темный халат, прорезиненный или резиновый фартук и нарукавники, резиновые сапоги или галоши. В летнее время на голову следует надеть полотняную шапочку.

Перед началом работы руки покрывают вазелином или жиром, предварительно смазав подноготные пространства и венчики пальцев настойкой йода. Запрещается одновременно работать ножами двум вскрывающим в одной и той же полости трупа; нельзя втыкать инструмент в скелетные мышцы или оставлять его в полостях трупа, это может привести к ранению рук или потере инструмента.

В случае ранения руки рану необходимо промыть водой с мылом, смазать настойкой йода, наложить марлевую повязку, надеть резиновые перчатки и продолжать вскрытие.

После окончания работы трупный материал убирают.

Руки моют водой и дезинфицируют 2-3%-ным раствором карболовой или уксусной кислоты или 4%-ным раствором формалина. Для уничтожения запаха разложившихся трупов руки можно погрузить в 5%-ный раствор марганцовокислого калия, затем в насыщенный раствор щавелевой кислоты, который устраняет бурую окраску кожи, возникающую в результате действия марганцовокислого калия.

Нарукавники, фартук и сапоги обмывают водой и дезинфицируют 3%-ным раствором хлорамина, лизола или фенола; перчатки на руках моют водой, дезинфицируют, насухо вытирают, посыпают тальком и снимают.

Инструмент обмывают теплой водой, дезинфицируют 3-4%- ным раствором креолина, лизола, хлорамина или кипячением в 1- 2%-ном растворе соды режущее острие инструмента при кипячении обертывают ватой или марлей.

Уничтожение трупов животных

Существует три метода уничтожения трупов животных: переработка их на ветеринарно-санитарных утилизационных заводах в мясокостную муку, сжигание и обезвреживание в биотермических ямах;

При особо опасных инфекционных болезнях (сибирская язва, эмкар, чума крупного рогатого скота и др.) трупы подлежат только сжиганию. Их можно утилизировать только на ветеринарно- санитарных утилизационных заводах, где возбудитель болезни полностью обезвреживается. Сжигают трупы животных в трупосжигательных ямах и трупосжигательных печах различных конструкций.

Для уничтожения и обеззараживания трупов животных используются также биотермические ямы (ямы Беккари), в которых они разлагаются под воздействием усиленно развивающихся термофильных бактерий, при этом температура в ямах достигает 70 0 С, что обеспечивает гибель не только патогенных микробов, но и их споровых форм, которые успевают прорасти в вегетативную форму.

Менее эффективным в ветеринарно-санитарном отношении способом уничтожения трупов животных является захоронение трупов на скотомогильниках.

Техника вскрытия трупов животных

Перед вскрытием трупа собирают анамнез, который имеет большое значение для анализа морфологических изменений, обнаруживаемых при вскрытии трупа животного. Он дает возможность не только определить болезнь, вызвавшую смерть животного, но и установить причины ее возникновения, пути заноса инфекции и др.

Прежде чем приступить к вскрытию трупа животного, павшего внезапно или после болезни с неясными клиническими признаками, обязательно исследуют мазки крови для исключения сибирской язвы. Трупы сибиреязвенных животных не вскрывают. При кишечной форме сибирской язвы животные нередко погибают от вздутия пищеварительного тракта, при жизни сепсис у них не успевает развиться, и результаты исследования мазков крови будут отрицательными. Б таких случаях осторожно вскрывают брюшную полость, осматривают селезенку, тонкие и толстые кишки, в которых через стенку хорошо видны сибиреязвенные карбункулы очаги геморрагического воспаления слизистой оболочки. Б карбункулах можно сделать мазки-отпечатки для микроскопического исследования.

Порядок извлечения внутренних органов определяется видом животного и особенностями его анатомического строения.

Существуют два основных метода вскрытия трупов животных. Первый метод исследования по анатомо-физиологическим системам организма: метод частичного расчленения органов у трупов крупных животных (крупный рогатый скот, лошадь и др.). Извлекаются органы трупа несколькими частями с сохранением их анатомо-физиологической связи. Например, у крупного рогатого скота извлекают комплексы органов: язык, глотку, гортань, пищевод, трахею, легкие и сердце; преджелудки и сычуг; печень и двенадцатиперстную кишку; тощую, подвздошную, слепую и ободочную кишки; матку и мочевой пузырь и т.д.

Второй метод — полная эвисцерация (лат. eviscerare — извлекать внутренности) всего органокомплекса по способу, разработанному Г.В. Шором. Метод используется при вскрытии мелких животных (свиньи, телята, овцы, собаки и др.). Органы ротовой полости, шеи, грудной, брюшной и тазовой полостей извлекаются из трупа единым органокомплексом с сохранением анатомической связи между ними.

Все обнаруженные морфологические изменения в органах и тканях заносятся в описательную часть протокола вскрытия.

Общий осмотр трупа начинают с определения вида и пола животного, его возраста, масти, массы и промеров — длины и высоты тела (при необходимости).

При наружном осмотре определяют внешний вид трупа, состояние естественных отверстий и видимых слизистых оболочек (ротовая полость, глаза, уши, носовая полость, анальное отверстие и наружные половые органы), кожи и ее производных (рога, копыта, когти, шерсть, перо), поверхностных лимфатических узлов (подчелюстные, заглоточные, поверхностные шейные, надколенные, наружные паховые лимфоузлы), скелетных мышц и сухожилий, костей и суставов. Определяют также трупные изменения (охлаждение и окоченение трупа, посмертное свертывание крови, трупные пятна и разложение).

Внутренний осмотр: определяют состояние и содержимое брюшной и грудной полостей; извлеченных органов ротовой, грудной и брюшной полостей, шеи; головы и позвоночника, головного и спинного мозга; носовых и придаточных полостей.

Для снятия кожи трупу придают спинное положение с помощью подставок по бокам. Разрезают кожу, начиная от угла нижней челюсти, по средней линии тела, вдоль трахеи, грудной кости, по белой липни до препуция (у самцов) и вымени (у самок), где разрез раздваивается в обход указанных органов, а дальше снова сливается и заканчивается у основания хвоста, обходя справа и слева заднепроходное отверстие и наружные половые органы самки.

Затем от паха разрезают кожу задних конечностей, от груди вдоль передних конечностей до путового сустава. Круговые разрезы делают в области путовых суставов всех конечностей и позади углов рта. Снимают кожу с головы или конечностей, отделяя ее от губ, глаз, основания рогов (у рогатого скота); хрящ ушных раковин отрезают и отделяют вместе с кожей. Далее кожу снимают с шеи, груди, передних конечностей, живота, задних конечностей с одной, а затем с другой стороны и со спины. Хвост перерезают в области 3-4-го хвостового позвонка и оставляют вместе с кожей.

Чтобы не повредить кожу, во время работы ее сильно оттягивают от тела, подрезают ножом подкожную клетчатку, направляя лезвие ножа к трупу.

Снятую кожу осматривают со стороны подкожной клетчатки, обращая внимание на расположение и размер трупных пятен, отеков (серозные, геморрагические), кровоподтеков, определяют в подкожной клетчатке количество и цвет жира.

Запрещается снимать кожу с трупов животных, павших от ботулизма, брадзота овец, бешенства, злокачественного отека, эпизоотического лимфангита лошадей, мелиоидоза (ложный сап), оспы овец, коз и свиней, сапа лошадей, сибирской язвы, туляремии, чумы крупного рогатого скота, верблюдов и свиней, энтеротоксемии овец и эмфизематозного карбункула крупного рогатого скота.

Для проведения внутреннего осмотра органов трупу придают соответствующее положение. Трупы крупных животных вскрывают в боковом или полубоковом нравом (лошади) или левом (крупный рогатый скот) положении. Трупы мелких животных (свиньи, овцы, телята, собаки) вскрывают в спинном положении.

Техника вскрытия трупа крупного рогатого скота

Труп кладут на левый бок. Б этом положении наиболее объемный орган брюшной полости (рубец) — располагается внизу.

Вначале удаляют переднюю правую конечность, для чего ножом разрезают мышцы, связки, сосуды и нервы в подлопаточной области, затем правую заднюю конечность отделяют по тазобедренному суставу, разрезая мышцы бедра, круглую связку и капсулу тазобедренного сустава.

Брюшную полость вскрывают линейным разрезом брюшной стенки на 1-2 см выше белой линии, от мечевидного отростка грудной кости и кончая лонным сращением таза. Разрезают жировой и мышечный слой брюшной стенки до брюшины, прорывают ее пальцами левой руки, вставляют в отверстие раздвинуть указательный и средний пальцы левой руки и под контролем пальцев разрезают брюшину.

Второй разрез делают по краю правого подреберья (костной дуги ребер) от мечевидного отростка грудной кости до позвоночника, затем вдоль поперечных отростков поясничных позвонков к паху. Таким способом брюшная стенка справа отрезается полностью.

Дополнительно производят небольшой разрез брюшной стенки в нижележащем левом боку по линии пупка, чтобы облегчить извлечение преджелудков, сычуга и кишечника.

Во вскрытой брюшной полости определяют положение органов: оно бывает анатомически нормальным или с какими-либо смещениями органов, отмечают постороннее содержимое брюшной полости, характер его (отечная прозрачная или кровянистая жидкость, серозный, фибринозный или геморрагический экссудат, сгустки крови, пищевые массы в случае разрыва рубца или кишечника), количество, консистенцию, запах. В норме в брюшной полости содержится небольшое количество прозрачной желтоватой серозной жидкости.

Исследуют состояние пристеночной и висцеральной брюшины, сальника, брыжейки, отмечают положение купола диафрагмы. Определяют цвет брюшины, гладкость или тусклость, наложения, кровоизлияния. В норме серозный покров серый, полупрозрачный, блестящий, гладкий, купол диафрагмы расположен на уровне 5-6-го ребра.

После вскрытия и осмотра брюшной полости вскрывают грудную полость в следующем порядке: рассекают диафрагму полукругом с правой стороны по линии соединения ее с ребрами. Удаляют правую грудную стенку, для чего перепиливают или перерубают ребра, отступая от позвоночника на 10-15 см. Разрезав хрящи, соединяющие ребра с грудной костью, отделяют правую половину грудной клетки.

В грудной полости определяют положение органов, постороннее содержимое (количество, состав, консистенцию, цвет, прозрачность, запах), состояние реберной плевры (влажность или сухость, блеск или шероховатость, цвет, прозрачность, спайки, наложения). В норме плевра серая, полупрозрачная, блестящая, гладкая.

Продольным разрезом можно рассечь сердечную сумку и осмотреть полость перикарда, обратив внимание на постороннее содержимое сердечной сорочки, травмы инородными предметами и на другие патологические изменения. Детально осматривают перикард при вскрытии и исследовании сердца.

Исследовав брюшную и грудную полости, приступают к извлечению органов. Б первую очередь удаляют большой и малый сальники, приподымая их за задний свободный край и обрезая ножом вдоль двенадцатиперстной кишки, большой кривизны сычуга, книжки и правой борозды рубца. Б результате обнажаются правая половина полости таза, часть тонких кишок, правая половина толстого кишечника и слепая кишка.

Извлечение органов из трупа начинают с кишечника. Удаляют тонкий и толстый кишечник целиком вместе с брыжейкой, предварительно наложив две лигатуры (на расстоянии 10 см друг от друга) в начальной части и две лигатуры позади S-образной кривизны (возле правой почки) на двенадцатиперстной кишке и перерезают кишку между парными лигатурами. Отрезок кишки, в который впадает желчный проток, остается связанным с печенью. Надавливая на желчный пузырь, проверяют проходимость желчного протока. На конечную часть прямой кишки накладывают лигатуру, кишку перерезают и отделяют от брыжейки. Оттягивая кишечник от позвоночника, подрезают корень брыжейки и удаляют весь кишечник (тонкий и толстый) полностью вместе с брыжейкой и брыжеечным и лимфоузлами.

Преджелудки с сычугом удаляют в следующем порядке. Оттягивают рубец от позвоночника и отпрепаровывают соединительнотканную клетчатку между рубцом и брюшной стенкой. На впадающий в рубец отрезок пищевода накладывают лигатуру, чтобы не вылилось содержимое рубца, и разрезают пищевод вблизи нее. Поскольку селезенка соединена с рубцом, их извлекают вместе и отрезают от рубца.

Конец прямой кишки удаляют с органами тазовой полости маткой и мочевым пузырем. Вначале обрезают длинным ножом ткани с внутренней поверхности костей таза и, вытягивая матку и прямую кишку в сторону брюшной полости, отсекают оставшиеся соединения.

Печень извлекают вместе с отрезком двенадцатиперстной кишки и поджелудочной железой, обрезая связки печени с диафрагмальной стороны. После этого удаляют правую и левую почки с надпочечниками и мочеточниками. Почки легко извлечь рукой, если возле них разрезать полукругом брюшину.

Органы ротовой полости, шеи и грудной полости извлекают в виде единого органокомплекса: язык, глотку, гортань, пищевод, трахею, легкие и сердце, начиная с языка. Чтобы легче было отделить эти органы, ножом перерезают все мышцы в подчелюстном пространстве с левой, а затем с правой стороны, прижимая нож к ветвям нижней челюсти. Вытягивают рукой конец языка в межчелюстное пространство, подрезают уздечку его, мягкое небо, рассекают в подъязычной кости хрящ на месте соединения больших и малых ее ветвей. Затем обрезают ткани вокруг глотки, гортани, пищевода и трахеи (с внутренней стороны первого ребра), обрывают средостение, обрезают диафрагму по месту прикрепления ее к ребрам. Подтягивая на себя, вынимают весь органокомплекс.

В последнюю очередь от туловища отделяют голову в месте соединения ее с первым шейным позвонком (атлантом), для чего голову откидывают назад, с внутренней (вентральной) поверхности разрезают ножом вентральную мембрану, капсулы суставов, боковые связки, продолговатый мозг, а затем дорсальную мембрану затылочно-атлантного сустава. Перерезав мягкие ткани с дорсальной поверхности сустава, легко отделяют голову.

Труп лошади перед вскрытием кладут на правый бок. В этом положении наиболее массивный толстый кишечник лежит снизу. Отрезают левые переднюю и заднюю конечности. У самцов отпрепаровывают препуций и половой член до его корня, у кобыл отрезают вымя. Разрезают брюшную стенку по средней линии, отступив 1-2 см от белой линии, начинают разрез от мечевидного хряща грудной кости и ведут до лонного сращения тазовых костей. Затем подрезают ее по краю левого подреберья (костной дуги ребер) от мечевидного отростка грудной кости до позвоночника, ведут разрез вдоль поперечных отростков поясничных позвонков к паху. Таким образом, брюшная стенка слева отрезается полностью. Дополнительно делают надрез брюшной стенки в правом боку по линии пупка для облегчения извлечения кишечника из брюшной полости.

Осматривают брюшную полость, отмечая положение органов, постороннее содержимое, состояние пристеночной брюшины, сальника, брыжейки, серозного покрова кишечника и положение купола диафрагмы (в норме на уровне 7-го ребра).

Грудную полость вскрывают так же, как и у крупного рогатого кота. Определяют положение органов, постороннее содержимое, состояние реберной плевры.

После этого извлекают органы из брюшной полости, удаляя сальник и селезенку, а затем кишечник в следующем порядке. Петлю большой ободочной кишки вытягивают в стороны конечностей трупа, малую ободочную кишку откидывают за спину трупа.

Удаление тонкого кишечника лучше начинать с подвздошной кишки. Ее конечную часть находят у места впадения в слепую кишку, накладывают две лигатуры и между ними перерезают кишку, затем отделяют от брыжейки последовательно подвздошную, тощую и двенадцатиперстную кишки, обрезая брыжейку как можно ближе к стенке кишки.

Дойдя до места связки двенадцатиперстной и малой ободочной кишок, перевязывают двумя лигатурами двенадцатиперстную и перерезают ее между ними вместе со связкой. Тонкий кишечник можно удалять и в обратном порядке, начиная с двенадцатиперстной кишки и кончая подвздошной. После удаления кишечника осматривают и отрезают брыжеечные лимфоузлы.

После извлечения тонкого кишечника передний и задний концы малой ободочной кишки накладывают по две лигатуры, перерезают кишку между ними, отделяют ее от брыжейки и удаляют.

Перед удалением большой ободочной и слепой кишок разрезают аорту и переднюю брыжеечную артерию, которая отходит от аорты на уровне первого поясничного позвонка, и осматривают их. У лошадей в передней брыжеечной артерии у места отхождения от аорты часто бывают тромбы и аневризмы паразитарного происхождения.

Оттянув от позвоночника большую ободочную кишку, перерезают корень брыжейки и извлекают вместе с большой ободочной и слепую кишку. Прямую кишку удаляют вместе с органами тазовой полости (матка, мочевой пузырь), обрезая ткани с внутренней поверхности костей таза.

Удаляют левую и правую почки с надпочечниками и мочеточниками, а затем желудок, печень и поджелудочную железу.

Язык, глотку, гортань, пищевод, трахею, легкие и сердце извлекают единым органокомплексом, как и у крупного рогатого скота.

Техника вскрытия трупов мелких животных

При вскрытии трупов мелких животных (свиней, телят, овец, собак и др.) все органы удаляют единым органокомплексом без нарушения естественной связи между ними (полная эвисцерация по методу Шора).

Труп вскрывают в спинном положении. Сначала подрезают задние конечности в тазобедренных суставах, передние отделяют от грудной клетки до лопаточных хрящей. Брюшную стенку разрезают по средней линии от мечевидною хряща грудной кости до лонного сращения тазовых костей и делают два дополнительных поперечных разреза. Брюшную стенку можно удалять и круговым разрезом вдоль ребер и позвоночника.

Определяют положение органов брюшной полости, постороннее содержимое в ней, состояние пристеночной и висцеральной брюшины, сальника и брыжейки.

Грудную полость вскрывают, удаляя грудную кость и перерезая хрящи между грудной костью и ребрами. Можно также удалить грудную стенку с одной или с двух сторон, перерезав ребра реберными ножницами вблизи позвоночника и грудной кости. Во вскрытой полости определяют положение органов, постороннее содержимое и состояние реберной плевры.

После этого извлекают органы ротовой полости, шеи, грудной, брюшной и тазовой полостей единым органокомплексом. Вначале разрезают мышцы нижней челюсти и извлекают язык, перерезают сочленение между ветвями подъязычной кости, затем левой рукой подтягивают язык, а правой перерезают ткани вокруг глотки, гортани, трахеи, пищевода с внутренней поверхности первой пары ребер и извлекают вместе комплекс органов головы, шеи, легкие и сердце. Затем подрезают диафрагму и извлекают из трупа все органы брюшной полости.

Осматривают органы, не отделяя их друг от друга. При необходимости можно разъединить и обследовать каждый орган в отдельности. Исследуют язык, глотку, пищевод, гортань и трахею, затем бронхиальные и средостенные лимфоузлы, легкие, сердце, почки с надпочечниками, печень и желчный пузырь, поджелудочную железу, селезенку, мочевой пузырь и половые органы. Последним осматривают желудок, перерезая его стенку по боковой линии и оставляя нетронутым дно. Кишечник осматривают после отделения его от брыжейки.

При вскрытии трупов птиц определяют вид, пол, возраст птицы, осматривают оперение, затем удаляют перья с живота, груди и шеи. Чтобы перо не мешало вскрытию, труп смачивают водой. Если на трупе есть паразиты, его выдерживают несколько минут в 10%-ном растворе формалина или 1%-ном растворе карболовой кислоты или лизола и промывают водой.

Осматривают кожу, гребень, сережки, глаза, клоаку, видимые слизистые оболочки. При необходимости кожу можно снять целиком или частично в области живота, груди и шеи и осмотреть подкожную клетчатку, мышцы, киль грудной кости. После этого трупу придают спинное положение, надрезав ноги по тазобедренным суставам.

Брюшную стенку разрезают ножницами посередине от клоаки до острия грудной кости и продолжают вправо и влево до подреберья. Разрез брюшной стенки можно делать и в виде полукруга. После этого удаляют грудную кость, перерезав с обеих сторон реберными ножницами (а у цыплят обычными ножницами) стернальные ребра, каракоидную кость и ключицу.

При осмотре грудо-брюшной полости определяют состояние воздухоносных мешков, постороннее содержимое полости, положение органов, состояние серозных оболочек.

Извлекают сначала печень, затем желудки (железистый и мышечный) и кишечник. Селезенку удаляют вместе с желудками. Она располагается в углу, образуемым железистым и мышечными желудками. У самок и удаляют яйцепровод и яичник. Затем извлекают сердце, вылущивают скальпелем из межреберий легкие и удаляют почки и надпочечники.

Ротовую полость, органы шеи, зоб, а также тимус вскрывают, не извлекая их из трупа. Для этого острую браншу ножниц вводят в ротовую полость и разрезают нижнюю челюсть у основания клюва, в результате открываются для осмотра ротовая полость и глотка. Затем разрезают пищевод, зоб, гортань и трахею, осматривают их слизистую оболочку и содержимое.

Осмотр органов проводят так же, как и у млекопитающих, но желудки не отделяют от кишечника. Вскрывают вначале железистый желудок, разрезая его вдоль, затем мышечный, в котором обязательно снимают кутикулу, и после этого кишечник.

Кроме того, в трупе осматривают клоаку и фабрициеву сумку, расположенную дорсально от клоаки. Кости и костный мозг исследуют на продольных распилах.

Перед вскрытием черепной полости с черепа срезают височные мышцы (кожа с головы должна быть обязательно снята). Вскрывая черепную полость, делают один поперечный и два боковых распила лучковой пилой. У жвачных, собак и кошек поперечный распил производят на уровне верхнего края глазных отростков лобных костей, у свиней на 2 см впереди глазных отростков, у лошадей на 1-1,5 см сзади глазных отростков.

Боковые распилы должны соединять края поперечного распила с затылочным отверстием. У крупного рогатого скота делают еще продольный распил черепной крышки по ее средней линии. Полностью отпиленная черепная крышка должна быть подвижной. С помощью долота и щипцов-костодержателей отделяют черепную крышку. Черепную коробку можно вскрывать, разрубая кости черепа острым долотом и молотком или топором в тех же местах, где распиливают пилой.

У птиц головной мозг извлекают, распилив отрезанную от туловища голову по средней линии на две симметричные половины или другим способом: черепную коробку разрезают обычными ножницами по линии, которая проходит посредине глазных орбит, а по бокам — в виде дуги к затылочному отверстию. Дополнительно делают разрез по средней линии черепной крышки. Образовавшиеся симметричные половинки снимают и открывают мозг.

Осмотр проводится в следующей последовательности: органы ротовой полости и шеи (язык, глотка, пищевод, гортань и трахея); легкие, бронхиальные и средостенные лимфоузлы; сердце и сердечная сорочка; селезенка; печень, почки, надпочечники, мочеточники и мочевой пузырь; головной и спинной мозг; глубокие паховые лимфоузлы и половые органы; брыжеечные лимфоузлы, кишечник и желудок. Указанная последовательность осмотра органов не обязательна для всех случаев вскрытий, при необходимости ее можно изменять.

При осмотре внутренних органов обращают внимание на рисунок органа. Так в печени и легких на разрезе определяют выраженность или стертость дольчатого строения, в селезенке — рисунок узелков и трабекул, в лимфатических узлах — четкость узелкового строения, в сердечной и скелетных мышцах -яркость волокнистого строения, в почках и надпочечниках состояние границы между корковым и мозговым слоями, в головном мозге — границу между серым и белым веществом, в спинном мозге определяют рисунок строения серого вещества, напоминающий крылья бабочки, в тимусе и молочной железе — рисунок долек.

При описании патологических очагов устанавливают их локализацию, количество, величину.

Величина очагов может быть различной. Некрозы — субмилиарные (с маковое зерно), милиарные (просовидные), нодулярные (5-10 мм), нодозные (10-30 мм), в виде крупных очагов в диаметре до 10 см и больше, некроз слизистых оболочек в виде струпьев (корочек). Воспаление легких — ацинозные очаги (1-5 мм), лобулярные (5-10 мм), лобарные с охватом целых долей. Кровоизлияния точечные, пятнистые, полосчатые, диффузные. Абсцесс — 2-5-10 см в диаметре. В почках — тотальный некроз.

Форма очагов может быть круглой, узловатой, грибовидной, треугольной, квадратной, ромбовидной, неправильной.

Консистенция — твердая, плотная, мягкая, слизистая, тестоватая, крепитирующая.

Цвет — белый, красный, коричневый, черный, бурый, желтый, зеленый (в зависимости от наличия в очагах физиологических или патологических пигментов).

Рисунок строения обычно стерт, но может принимать другой вид по сравнению с нормальным органом, например, в фиброме и лейомиоме — перекрещивание пучков соединительной или мышечной ткани.

Реакция вокруг очага может быть неодинаковой. Острые некрозы окружены красного цвета воспалительной демаркационной зоной, хронические некрозы инкапсулированы. Ареактивные некрозы в слизистых оболочках пищеварительного тракта (при стахиботриотоксикозе лошадей) окружены кровоизлияниями, острые абсцессы окружены пиогенной зоной, хронические — капсулой. Могут развиваться секвестры, когда между капсулой и очагом некроза накапливается гнойный экссудат.

Взятие материала для лабораторных исследований

После вскрытия трупов животных для подтверждения предварительного диагноза болезни проводят бактериологическое, вирусологическое, гистологическое, химическое и другие лабораторные исследования. Для этого при вскрытии отбирают соответствующий патологический материал, который направляют в ветеринарные лаборатории.

Для бактериологического исследования патологический материал берут как можно раньше после смерти животного, особенно и теплое время года, так как материал от разложившегося трупа для исследования не пригоден.

Патологический материал для бактериологического исследования отправляют в лабораторию в неконсервированном виде. Если же нет возможности доставить его в лабораторию в течение суток, то патологический материал консервируют в 30-50% — ном водном растворе химически чистого глицерина. Количество консервирующей жидкости должно быть в 4-5 раз больше объема патологического материала.

Материал для вирусологического исследования необходимо брать от вынужденно убитых животных или от трупов не позже, чем 1-1,5 часа после смерти.

Его направляют в замороженном виде в термосе со льдом. Также консервируют 30-50%-ным водным раствором химически чистого глицерина на изотоническом (0,9-ном) растворе натрия хлорида.

Трупы небольших животных (поросят, ягнят, телят, птицы) посылают целыми в непроницаемой таре с нарочным.

Для гистологического исследования от свежих трупов павших или вынужденно убитых животных из разных участков патологически измененных органов и тканей вырезают тонкие кусочки длиной и шириной 1-2 см, толщиной не более 1 см, помещают их в стеклянные с 10%-ным водным раствором формалина (10 мл продажного формалина на 90 мл воды). Объем консерванта берут в 10 раз больший, чем объем взятого материала. Б формалине его фиксируют в течение 2-5 суток, причем жидкость через сутки с начала фиксации заменяют свежей. Б зимнее время фиксацию проводят в теплом помещении.

На банку, где консервируют кусочки органов, наклеивают ярлык с указанием номера или клички животного, внутрь опускают этикетку из плотной бумаги с теми же надписями простым карандашом или шариковой ручкой. Если в одну посуду помещают несколько кусочков от разных животных, то каждый из них завязывают в марлю вместе с отдельной этикеткой.

Для химико-токсикологического исследования в лабораторию направляют в отдельных стеклянных или глиняных банках часть пищевода и желудка с содержимым (0,5 кг), отрезки тонкого и толстого кишечника (40 см длиной, 0,5 кг), перевязанные с обоих концов, часть печени (0,5 кг) с желчным пузырем, почку, мочу (0,5 л), скелетные мышцы (0,5 кг). Взятый материал не обмывают водой, не консервируют и отправляют с нарочным в опечатанных банках.

На посылаемый патологический материал составляется сопроводительный документ по определенной форме. В запечатанном конверте его посылают вместе с материалом с нарочным или почтой. В сопроводительном письме указывают вид, пол и возраст животного, от которого взят материал, его номер или кличку, количество банок с материалом, на какое исследование посылается, кратко описывают клинические признаки и патологоанатомические изменения. К письму могут быть приложены дополнительные сведения.

Методы диагностики заразных болезней

Бактериологическое исследование применяется для выявления патогенных бактерий в материале от больных животных или их трупов, обнаружение микробов в объектах внешней среды, кормах, мясе и т.д.

Исследуемый материал по возможности собирают в асептических условиях в стерильную посуду (от трупов не позднее 2-3 часов после смерти животных, в ряде случаев целесообразен вынужденный убой 1-2-х из группы больных животных) и доставляют в ближайшее время в не консервированном, консервированном(30%-ым водным раствором глицерина или вазелиновым маслом, 0,5%-ым раствором фенола), замороженном (допускается при туберкулезе и др.) виде с сопроводительным документом в лабораторию (в нем указаны дата взятия, характер и источник материала, основные клинические признаки болезни и патологоанатомические изменения, цель исследования).

Бактериологические исследование включает: бактериоскопию мазков исследуемого материала, выделение чистой культуры бактерий с последующим изучением морфологических, культуральных, биохимических, антигенных и патогенных свойств бактерий.

Микроскопия позволяет обнаружить в материале микробов, изучить их морфологию (форму, размер, взаимное расположение клеток, структурные компоненты: капсулы, споры, жгутики, включения) и тинкториальные свойства. Для этого из патологического материала готовят мазки-отпечатки из органов, тканей или препараты-мазки из другого исследуемого материала, высушивают на воздухе, фиксируют (чаще фламбированием или химическим способом) и окрашивают тем или иным методом в зависимости от направленности исследования. Окраску микробов проводят простым (один краситель) и сложным методами( основной и дополнительный красиитель, вспомогательные реактивы).Сложные методы (Грама, Циль-Нильсена, Романовского- Гимза, Гинса и др.)позволяют отличить одну группу микробов от другой, выявить отдельные элементы микробной клетки( споры, капсулы).

Для обнаружения некоторых бактерий (напр., возбудителя туберкулеза) патологический материал предварительно обрабатывают одним из методов обогащения, повышая в нем концентрацию бактерий и избавляясь от посторонних микробов.

При обнаружении бактерий используют и люминесцентную микрос-копию. Для определения подвижности микробов используют микроскопию молодой (12-24 ч.) живой культуры с помощью препаратов «раздавленная или висячая капля», а также на основе роста бактерий в полужидком МПА.

Выделение культуры бактерий проводят путем посева материала на соответствующие (в зависимости от питательных потребностей возбудителя) питательные среды. Посев на плотные питательные среды в бактериологи-ческих чашках проводят путем растирания шпателем нескольких капель материала по поверхности среды. При исследовании паренхиматозных органов убитых или павших животных обжигают или фламбируют кусочек органа, затем надрезают его стерильными ножницами и с помощью пинцета проводят надрезанной поверхностью по питательной среде в чашке. Б жидкую среду посев материала делают пастеровской пипеткой. С целью получения роста изолированных колоний (при их пересеве получают чистую культуру бактерий)микробов чаще используют дробный посев или пересев(метод Дригальского) на несколько чашек с плотной средой. Чистую культуру получают также высевая патматериал на элективные среды, заражением лабораторных животных и прогреванием содержащего споры материала в водяной бане при 80 0 С 30 мин.

Засеянные чашки и пробирки инкубируют в термостате при оптимальной для роста каждого вида бактерий температуре (чаще 37 0 С) в течении обычно 1-2 суток(некоторых случаях до 30-60 суток, например возбудитель туберкулеза).

Для идентификации выделенных бактерий изучают только чистые культуры. Идентификацию проводят всесторонним изучением их культураль-ных, морфологических, биохимических, серологических и патогенных свойств.

При оценке роста на жидких питательных средах определяют степень и характер помутнения среды, характер осадка, наличие пленки и пристеночного кольца. При изучении роста микробов на твердых средах обращают внимание на характер роста (скудный, пышный, однородный или неоднородный), число колоний, их величину, форму, структуру, цвет, прозрачность.

Биохимическую активность изучают чаще всего на дифференциально-диагностических средах (Гисса, Клиглера, Эндо, Кристенсена и др.), определяя при этом сахаролитические, протеолитические и редуцирующие свойства.

Антигенную структуру микробов изучают при помощи различных серологических реакций — РА, РН, РП, РСК и др., позволяющих выявить различия между близкородственными видами некоторых бактерий, а также отдельными штаммами внутри вида.

Фаготипирование, как метод идентификации микробов, проводят при помощи бактериофагов.

Определение патогенных свойств бактерий проводят путем заражения лабораторных животных культурами или фильтратом культуры (при определении токсинообразования).

После изучения свойств бактерий сопоставляют полученные данные с признаками бактерий имеющимися в соответствующих инструкциях, ГОСТах по лабораторной диагностике инфекционных заболеваний, определителе микробов (Д.Берджи,1994) и проводят их родовую и видовую дифференциацию. Б сомнительных случаях проводят повторное исследование материала. Результаты исследования записывают в журнал бактериологических экспертиз, указывая какой микроб выделен из исследуемого материала.

1. Б нем не использовались радиоактивные изотопы. Отсутствие радиационной опасности значительно упрощает условия проведения реакции.

Определение болезней животных методом газовой хроматографии

Рис. 4.3.1 Состав выдыхаемого лошадью воздуха анализируют с помощью газовой хроматографии

Группа учёных из Института сравнительной медицины университета Глазго (Glasgow University) разработала технологию диагностики болезней животных по их дыханию. Этот способ не такой травмирующий, как взятие крови или биопсия ткани.

«Есть приблизительно 3 тысячи веществ в выдыхаемом воздухе, а о происхождении многих из них мы и понятия не имеем. Но есть свидетельства, что многие болезни имеют уникальную «подпись» в дыхании» — сказала доктор Кэти Вайз (Cathy Wyse).

В течение многих столетий, доктора, имеющие дело с пациентами-людьми знали, что определённые ароматы в дыхании — хороший индикатор проблем со здоровьем.

Теперь проверка дыхания понемногу входит в арсенал диагностов. Разумеется, проверка с самыми новейшими приборами (масс- спектрометрия, газовая хроматография и биодатчики), способными определять мельчайшие концентрации веществ.

Так удаётся диагностировать широкий спектр болезней. По составу дыхания можно определить не только заболевания лёгких или желудка, но проблемы с сердцем и даже канцерогенные недуги

В настоящее время разработан способ распространения этой технологии на ветеринарию. Специальные маски для крупных животных — лошадей или собак, специальные коробки для мелкой живности — кошек, грызунов, — позволяют взять пробы дыхания без проблем.

Авторы исследования полагают, что диагностика по дыханию находится только в начале своего расцвета.

Заключение

Хроматография изучает термодинамику состояния двухфазных систем газ-жидкость, жидкость-жидкость, жидкость-твердое тело, исследует природу межмолекулярных взаимодействий, кинетику процессов внутреннего и межфазного массообмена, процессы комплексообразования, ассоциации и образования соединений включения, стереохимию органических соединений и многое другое.

В связи с исключительной многогранностью понятия «хроматография» оно не может быть охвачено одним единственным определением. В категориях «явление, процесс, метод, наука» хроматографию предложено определять как:

явление образования, движения и изменения концентрационных зон веществ (частиц) в условиях массообмена между несмешивающимися и движущимися относительно друг друга фазами или на границе раздела этих фаз;

процесс дифференцированного многократного перераспределения веществ или частиц между несмешивающимися и движущимися относительно друг друга фазами, приводящий к обособлении) концентрационных зон индивидуальных компонентов исходных смесей этих веществ или частиц;

метод разделения смесей веществ или частиц, основанный на различии в скоростях их перемещения в системе несмешивающихся и движущихся относительно друг друга фаз;

наука о межмолекулярных взаимодействиях и переносе молекул или частиц в системе несмешивающихся и движущихся относительно друг друга фаз.

В научной литературе встречаются и другие определения хроматографии, однако любое из них должно обязательно содержать среди отличительных видовых признаков упоминание о переносе веществ (частиц) в системе несмешивающихся и движущихся друг относительно друга фаз. Наличие как минимум двух фаз и их относительное движение, то есть динамика процесса, -неотъемлемые признаки хроматографии.

В общем случае хроматография это наука о принципах и методах разделения, количественного и качественного определения веществ, используя их различия (размер, заряд, массу, полярность и т.д.) в потоке на границе нескольких гетерогенных сред (газ и твердое тело, жидкость и твердое тело, газ и жидкость, несмешиващиеся жидкости и т.д.).

Хроматография имеет широкое применение в области биосистем. Причём в этой области используются различные классы. Это ионообменная хроматография, которая занимает ведущее место в анализе аминокислот. Также афинная хроматография, где обратимое взаимодействие между молеку­лами биполимеров и сорбентом может осуществляться за счет сил биологического сродства. Такие силы действуют, например, между ферментом и его субстратом или ингибитором, антигеном и антите­лом, гормоном и рецептором и т.д.( осуществления фракциони­рования по биологическому сродству). Хроматография нашла применение даже в таких современных методах как определение болезней животных по составу выдыхаемого ими воздуха. И этим область её применения не ограничивается.

1. Ленинджер Д., Основы биохимии. Т.1, 2, 3., М.: Мир, 2020

2. Микеш О., Новак И., Лабораторное руководство по хроматографическим и смежным методам Т.1, М.: Мир, 1982

3. Хевтман Э., Хроматография. Практическое приложение метода, М.: Мир, 1986

4. А.Гордон, Р.Форд, Спутник химика, М: Мир, 1976.

5. О.Д.Кушманова, Г.М.Ивченко, Руководство к лабораторным занятиям по биологической химии, М: Медицина, 1963.

Дата добавления: 2020-09-07 ; просмотров: 314 . Нарушение авторских прав

3. Хевтман Э., Хроматография. Практическое приложение метода, М.: Мир, 1986

Способ дифференциальной диагностики заболеваний печени у жвачных животных

Изобретение относится к области сельского хозяйства, а именно сельскохозяйственной биологии, животноводству, патологической физиологии, и может быть использовано для определения характера патологического процесса в печени у коров и овец. Целью изобретения является повышение точности диагностики заболеваний печени. У животных из яремной вены берут кровь и исследуют на сахар, кетоновые тела и пирровиноградную кислоту и по сумме показателей их содержания устанавливают диагноз, причем при 20-30 мг% диагностируют цирроз, при 30-40 мг% — гепатоз, при 40-50 мг% — гепатит и выше 50 мг% — клинически здоровых животных. Зависимость содержания сахара, кетоновых тел и пирровиноградной кислоты установлена при математической обработке. 1 табл.

РЕСПУБЛИК (я)э А 61 В 10/00

ГОСУДАРСТВЕ ННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ л

l (21) 4068842/15 (22) 20.05.86 (46) 07.09,91.Бюл.М 33 (71) Ьашкирский сельскохозяйственный институт (72) В.Н. Байматов (53) 616.071(088.8) (56) Левченко В.И., Дифференциальная диагностика болезней печени у телят, — Ветеринария, 1984, N. 11 ° с, 57-58, (54) СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКИ ЗАБОЛЕВАНИЙ ПЕЧЕНИ У

ЖВАЧНЫХ ЖИВОТНЫХ (57) Изобретение относится к области сельского хозяйства, а именно сельскохозяйственной биологии, животноводству, Изобретение относится к сельскому хозяйству, а именно сельскохозяйственной биологии, животноводству, патологической физиологии, и может быть использовано для определения характера патологического процесса в печени у коров и овцы.

Целью изобретения является повышение точности диагностики заболевания печени.

Пример. У жвачных животных из яремной вены берут кровь на исследование и определяют в ней содержание мг- ; Х— сахара, Y — кетоновых тел и 2 — пировиноградной кислоты, Полученные данные суммируют (P). Тогда P — X+Y+Z. При P больше

50 мгQ — животные клинически здоровы; при P 40-50 мг (— гепатит; при P 30-40 мг7ь— гепатоэ; при Р 20-30 мг — цирроз.

Показатели сахара крови, кетоновых тел и пировиноградной кислоты у жвачных жи„, Ж„„1674807 Al патологической физиологии, и может быть использовано для определения характера патологического процесса в печени у коров и овец. Целью изобретения является повышение точности диагностики заболеваний печени. У животных из яремной вены берут кровь и исследуют на сахар, кетоновые тела и пирровиноградную кислоту и по сумме показателей их содержания устанавливают диагноз, причем при 20-30 мг диагностируют цирроз, при 30-40 мг — гепатоз, при

40-50 мг$ — гепатит и выше 50 мг)I — клинически здоровых животных. Зависимость содержания сахара, кетоновых тел и пирровиноградной кислоты установлена при математической обработке. 1 табл. вотных при гепатите, гепатозе и циррозе печени приведены в таблице.

Состояние крови характеризуют заболевания печени при наличии взаимосвязи между сахаром, кетоновыми телами и пировиноградной кислоты, которая обнаружена при математической обработке, Причем при гепатите, гепатозе и циррозе печени у коров и овец выявили различную способность печени к кетогенезу и.ее способности поддерживать уровень гликемии и пируватемии, Так при гепатите у животных взаимосвязь между кетоновыми телами (Y) и уровня сахара крови (Х) выражается следующим образом:

1+ 387,22 х при гепатоэе у коров Y = — 0,85+

420,87 х е у овец Y- — 2.78 с — — —.

20,0 мг = )ь — пировиноградная кислота

2.8 мг = 7(, 47,8 мг — . Сумма этих показателей соответствует генатиту, Так как нами установлены граничные значения суммы сахара, кетоновых тел и пировиноградной кислоты для каждого заболевания печени: при P — 50 и больше — животные клинически здоровые; при P 40-50,0 мг — 7ь— гепатит; при P — 30-40 мг — 7, — гепатоз; при P -20-30 мг — (, — цирроз.

Составитель М. Белоусова

Редактор М, Бланар Техред M.Moðãåíòàë Корректор С. Черни

Заказ 2950 Тираж 428 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат «Патент», г. Ужгород, yn,Гагарина, 101

При циррозе Y — — 3,12 + — — — —. х

Все полученные уравнения высокодостоверны при коэффициенте корреляции

Я — 0,655; P — 0,999, при t больше 6. 5

Выявлена зависимость кетоновых тел (Y) от содержания пировиноградной кисло ты (Z). Y=44,78 + 2,2 2, при R-0,47; t-2,31;

P-0,95, т.е. увеличение пировиноградной кислоты в крови сопровождается процесса- 10 ми липолиэа и глюконеогенеза.

Установлено изменение уровня пировиноградной кислоты (Z) от содержания сахара в крови (Х):

2- 0,46+, при R = 0,52, t = 2,77;

Пример 2.Уовеци коров при гепатите, гепатоэе и циррозе печени (по 3 животных в каждой и 3 животных конт- 20 рольная группа) брали кровь и определяли в ней содержание сахара, кетоновых тел пировиноградной кислоты, Затем для каждого животного эти показатели суммировали, а по сумме определяли харак- 25 тер патологического процесса. Например: сахар крови 25.0 мг — $ + кетоновые тела

Способ дифференциальной диагностики заболеваний печени у жвачных животных, включающий взягие крови и ее исследование, отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа, исследование крови проводят на содержание сахара, пировиноградной кислоты и кетоновых тел и по сумме показателей их содержания устанавливают диагноз, причем при 20-30 мг диагностируют цирроз, при 30-40 мг (, — гепэтоз, при 40-50 мг — гепатит и выше 50 мг — клинически здоровых животных.

2- 0,46+, при R = 0,52, t = 2,77;